| 适于小麦叶片蛋白质组分析的样品提取方法研究 |
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| 引用本文： | 李红兵,康振生.适于小麦叶片蛋白质组分析的样品提取方法研究[J].西北植物学报,2011,31(3). |
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| 作者姓名： | 李红兵 康振生 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学,生命科学学院,陕西省农业分子生物学重点实验室,陕西杨陵,712100 |
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| 基金项目： | 公益性行业(农业)计划项目，高等学校学科创新引智计划资助项目 |
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| 摘 要： | 以‘铭贤169'小麦苗期叶片为材料,分别采用传统的TCA/丙酮沉淀法、酚提取-甲醇/醋酸铵沉淀法以及改进的TCA/丙酮沉淀-酚/SDS联合抽提法提取叶片总蛋白,进行双向电泳分离和胶体考染,以建立适用于小麦蛋白质组分析的样品制备方法.结果表明:TCA/丙酮沉淀法较酚提取-甲醇/醋酸铵沉淀法获得的蛋白杂质较少,在二维电泳图谱中的蛋白点较酚抽提-甲醇/醋酸铵沉淀法提取的蛋白点清晰且多.相比于以上2种提取蛋白样品方法,改进的TCA/丙酮沉淀-酚/SDS联合抽提法提取的小麦叶片蛋白杂质少、二维电泳图谱上的点明显增多、分辨率较高.所选小麦的代表性蛋白点能获得成功鉴定.该方法可推广应用于水稻叶片蛋白质组分析的样品提取.
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| 关 键 词： | 小麦叶片 双向电泳 质谱分析 蛋白质组 |
Sample Preparation Methods Suitable for Wheat Leaf Proteome Analysis |
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| LI Hong-bing,KANG Zhen-sheng.Sample Preparation Methods Suitable for Wheat Leaf Proteome Analysis[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2011,31(3). |
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| Authors: | LI Hong-bing KANG Zhen-sheng |
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| Institution: | LI Hong-bing,KANG Zhen-sheng(College of Life Science and Shaanxi Key Laboratory of Molecular Biology for Agriculture,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
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| Abstract: | The study is to develop sample preparation methods suitable for wheat leaf proteomic analysis by using wheat cultivar 'Mingxian 169'.Two traditional methods,including trichlomacetic acid(TCA)/acetone precipitation and phenol extraction-methanol/ammonium acetate precipitation extraction,and one modified method,TCA/acetone precipitation-phenol/SDS extraction,were adopted to extract leaf proteins of wheat.The prepared samples were separated by SDS-PAGE and two-dimensional electrophoresis(2-DE),followed by modi... |
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| Keywords: | wheat leaf two-dimensional electrophoresis(2-DE) mass spectrometry analysis proteome |
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