小麦TaWRKYⅢ-A37和TaWRKYⅡc-D2基因的克隆与表达分析 |
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引用本文: | 张玉玲,杜爽爽,田书军,闻珊珊.小麦TaWRKYⅢ-A37和TaWRKYⅡc-D2基因的克隆与表达分析[J].西北植物学报,2020,40(6):927-936. |
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作者姓名: | 张玉玲 杜爽爽 田书军 闻珊珊 |
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作者单位: | (西北农林科技大学 农学院/小麦分子生物学与生物技术实验室,陕西杨陵 712100) |
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基金项目: | 中央高校基本科研业务费专项资金(Z109021508) |
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摘 要: | 为了探究小麦(Triticum aestivum L.)WRKY基因的功能,采用同源克隆的方法,从小麦品种‘科农199’中克隆得到2个WRKY基因,分别命名为TaWRKYⅢ-A37和TaWRKYⅡc-D2,并对其进行生物信息学分析和不同逆境胁迫下的表达分析。生物信息学分析显示,TaWRKYⅢ-A37和TaWRKYⅡc-D2基因都含有2个内含子和3个外显子,分别编码206和138个氨基酸,编码蛋白都属于亲水性不稳定非分泌型的核蛋白。系统进化分析表明,TaWRKYⅢ-A37蛋白与其两个同源拷贝的亲缘关系最近,而TaWRKYⅡc-D2蛋白与粗山羊草亲缘关系最近。qRT-PCR结果表明,TaWRKYⅢ-A37和TaWRKYⅡc-D2基因在小麦根、茎和叶中均有表达,前者在根中表达量最高,后者在叶中表达量最高,二者均在茎中低表达;在苗期TaWRKYⅢ-A37基因受到PEG、H_2O_2和ABA胁迫后表达上调,NaCl处理后4~8 h内表达下调且低于对照表达水平,而且在灌浆期受到PEG、NaCl、H_2O_2和ABA胁迫后表达均上调;苗期TaWRKYⅡc-D2基因在NaCl、H_2O_2和ABA胁迫后表达下调,PEG处理2 h时表达上调且高于对照表达水平,并且在灌浆期经PEG和NaCl胁迫后表达下调,受H_2O_2和ABA胁迫后表达上调。该研究结果为深入探究TaWRKYⅢ-A37和TaWRKYⅡc-D2基因的抗逆功能奠定了理论基础。
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关 键 词: | 小麦 TaWRKYⅢ A37 TaWRKYⅡc D2 克隆 表达分析 |
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