番茄SlWRKY31基因启动子的克隆与逆境应答模式分析

该研究以野生型番茄（Solanum lycopersicum）为材料，采用PCR技术克隆得到了番茄 SlWRKY31 基因起始密码子 ATG 上游启动子序列，并利用该启动子驱动 GUS基因在野生型番茄中表达，对获得的转基因番茄采用不同胁迫处理后进行GUS 染色和定量分析。结果表明：（1）序列分析显示，该启动子全长1 849 bp，含有多个与非生物胁迫和激素响应相关的顺式作用元件，主要包括热胁迫响应元件 HSE、干旱诱导响应元件 MBS、防卫和胁迫响应元件 TC rich repeats、创伤诱导响应元件 WUN motif、脱落酸（ABA）响应元件 ABRE 和水杨酸（SA）响应元件 TCA element。（2）实时荧光定量 PCR 结果显示，SlWRKY31 基因呈组成型表达模式，且在叶和果实中表达量较高，茎中较低；在NaCl、甘露醇、SA、ABA 和42 ℃ 高温的胁迫处理下，其表达量显著升高。（3）构建 SlWRKY31 启动子和 GUS 基因融合的植物表达载体，并通过农杆菌介导法将其转化野生型番茄，对获得的转基因番茄进行 GUS 组织化学染色分析结果显示，SlWRKY31 基因在番茄的各个组织（根、茎、叶、花、果实和种子）中均有表达，表明 SlWRKY31 启动子是组成型表达启动子。（4）对转基因番茄在不同胁迫处理后的 GUS 染色和定量分析显示，SlWRKY31 启动子显著受到NaCl、甘露醇、SA、ABA 和42 ℃ 高温的诱导表达，说明该启动子是一个可以响应多种逆境胁迫的诱导型启动子。

Cloning and Analysis of Stress Response Pattern of SlWRKY31 Gene Promoter from Tomato