| 蝴蝶兰花瓣瞬时转化体系建立 |
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| 引用本文： | 孟 妮,刘雅莉,窦雪溪,刘红利,李方殷.蝴蝶兰花瓣瞬时转化体系建立[J].西北植物学报,2018,38(6):1017-1023. |
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| 作者姓名： | 孟 妮 刘雅莉 窦雪溪 刘红利 李方殷 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31471905） |
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| 摘 要： | 蝴蝶兰花器官中基因功能的研究受遗传转化效率低和遗传转化周期长的制约,而花瓣瞬时表达体系是一种快速分析基因功能的有效手段。该研究以蝴蝶兰‘大辣椒’花瓣和萼片为实验材料,通过农杆菌介导的瞬时转化方法,分析了侵染的菌液浓度、侵染时间、乙酰丁香酮浓度和共培养时间等4个因素对β-葡糖醛酸酶(GUS)报告基因表达效率的影响,以探寻其瞬时表达的最佳条件;并将查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因RNAi干扰载体瞬时转化蝴蝶兰花瓣,共培养3d后观察转化材料中花色表型以及色素的变化,并利用半定量RT-PCR来检测CHS基因转录水平的表达。结果表明:(1)农杆菌菌液OD600为0.6、侵染时间60s,在重悬液中添加150μmol/L乙酰丁香酮,共培养3d,GUS瞬时表达率最高(85.01%)。(2)转基因蝴蝶兰花瓣颜色明显变淡,色素含量降低。(3)半定量PCR检测表明,CHS基因的转录活性相比于对照组显著降低。该实验成功的在蝴蝶兰花器官中建立了一种快速基因功能验证方法,为后期蝴蝶兰基因功能研究和育种工作提供技术支持。
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| 关 键 词： | 蝴蝶兰 花器官 农杆菌转化 GUS 瞬时表达 |
Transient Gene Expression in Phalaenopsis aphrodite Petals via Agrobacterium tumefaciens Infiltration |
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| MENG Ni,LIU Yali,DOU Xuexi,LIU Hongli,LI Fangyin.Transient Gene Expression in Phalaenopsis aphrodite Petals via Agrobacterium tumefaciens Infiltration[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2018,38(6):1017-1023. |
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| Authors: | MENG Ni LIU Yali DOU Xuexi LIU Hongli LI Fangyin |
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