| GA2ox1氧化酶基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 常丽,赵小英,郭明,林建中,李秀山,刘选明.GA2ox1氧化酶基因的克隆及原核表达[J].西北植物学报,2010,30(6). |
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| 作者姓名： | 常丽 赵小英 郭明 林建中 李秀山 刘选明 |
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| 作者单位： | 湖南大学,生命科学与技术研究院,长沙,410082 |
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| 基金项目： | 国家863项目，国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR从拟南芥基因组中克隆到GA2ox1基因,通过Gateway克隆技术构建原核重组表达载体pDEST17-GA2ox1,并转化大肠杆菌BL(21)star,对蛋白原核表达条件进行优化.结果表明,最佳表达条件为温度30℃、IPTG浓度0.2 mmol/L、诱导6 h.蛋白表达形式为包涵体,与Biotech对GA2ox1基因在大肠杆菌中的表达情况推测的结论一致.重组蛋白分子质量约为40 kD,经Ni Sepharose亲和层析柱纯化和Western blot鉴定得纯度90%以上的GA2ox1重组蛋白.研究结果为GA2ox1抗体制备及蛋白功能的进一步研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | GA2ox1基因 Gateway克隆 原核表达 纯化 |
Cloning and Prokaryotic Expression of GA2ox1 Gene |
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| CHANG Li,ZHAO Xiao-ying,GUO Ming,LIN Jian-zhong,LI Xiu-shan,LIU Xuan-ming.Cloning and Prokaryotic Expression of GA2ox1 Gene[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2010,30(6). |
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| Authors: | CHANG Li ZHAO Xiao-ying GUO Ming LIN Jian-zhong LI Xiu-shan LIU Xuan-ming |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Western Blot |
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