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大豆GmF6′H1基因的克隆及功能验证
引用本文:王 蕾,张 娟,魏丽娟,刘林德.大豆GmF6′H1基因的克隆及功能验证[J].西北植物学报,2015,35(2):213-219.
作者姓名:王 蕾  张 娟  魏丽娟  刘林德
作者单位:(1 鲁东大学 生命科学学院,山东烟台 264025;2 鲁东大学 农学院,山东烟台 264025)
基金项目:国家自然科学基金(31100218);国家教育部回国人员科研启动基金(201023);鲁东大学博士启动基金;山东省自然科学基金(ZR2013CM018)
摘    要:以大豆品种‘黑农35号’为材料,利用同源克隆方法获得了一个依赖于Fe(Ⅱ)和2-酮戊二酸的双加氧酶基因,命名为GmF6′H1。荧光定量PCR分析显示GmF6′H1在大豆根中的表达量最高,其次是荚果、叶和茎;2,4-D处理对大豆GmF6′H1的转录水平影响很小,水杨酸和激动素的处理均显著提高了GmF6′H1基因的表达,但随着处理时间的延长表达水平稳定下降,最后接近处理前的水平。带有组氨酸标签的GmF6′H1异源表达的蛋白纯化后,以阿魏酰辅酶A为底物研究了其酶活特性,利用HPLC分析检测到GmF6′H1能够催化阿魏酰辅酶A生成东莨菪素。采用农杆菌介导法将该基因转入拟南芥Atf6′h1突变体,转基因拟南芥与Atf6′h1突变体植株外在表型没有明显的差异,而香豆素的含量分析显示,转基因株系根中香豆素的含量较拟南芥Atf6′h1突变体有所提高,与野生型拟南芥中香豆素的含量接近。

关 键 词:Fe(Ⅱ)和2-酮戊二酸依赖的双加氧酶  香豆素  GmF6′H1
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