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亚麻4CL基因克隆及RNAi遗传转化
引用本文:龙松华,李 翔,陈信波,乔瑞清,邓 欣,邱财生,郭 媛,郝冬梅,王玉富.亚麻4CL基因克隆及RNAi遗传转化[J].西北植物学报,2014,34(12):2405-2411.
作者姓名:龙松华  李 翔  陈信波  乔瑞清  邓 欣  邱财生  郭 媛  郝冬梅  王玉富
作者单位:(1 中国农业科学院麻类研究所,长沙 410205;2 湖南环境生物职业技术学院,湖南衡阳 421005;3 湖南农业大学 作物基因工程湖南省重点实验室,长沙 410128)
基金项目:国家自然科学基金(31000745);国家麻类产业技术体系(CARS-19-E14)
摘    要:该实验以前期克隆的亚麻4CL基因片段为靶序列,利用RACE方法克隆其全长cDNA序列(1 957bp),GenBank登录号为KC832864,该序列含有1 650bp完整的开放阅读框。系统进化树分析表明,亚麻4CL基因与盐芥4CL基因亲缘关系较近,而与禾本科的水稻(Oryza sativa)等亲缘关系最远。其编码蛋白预测分析结果显示,亚麻4CL基因由549个氨基酸组成,相对分子量为60kD,等电点为5.3,蛋白质二级结构以无规则卷曲比例最多,其次是α-螺旋。以亚麻4CL基因编码区413bp靶标序列作为干扰区段,扩增其正反向基因片段,构建植物干扰表达载体p1301M-4CL。通过农杆菌介导转入亚麻,DNA及RNA水平上分子检测发现,RNAi结构已经转入亚麻中,并显著降低了其4CL基因的表达量。

关 键 词:亚麻  木质素  CL基因  序列分析  RNAi载体  遗传转化

RACE Clone and RNAi Transformation of Flax 4CL Gene
LONG Songhu,LI Xiang,CHEN Xinbo,QIAO Ruiqing,DENG Xin,QIU Caisheng,GUO Yuan,HAO Dongmei,WANG Yufu.RACE Clone and RNAi Transformation of Flax 4CL Gene[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2014,34(12):2405-2411.
Authors:LONG Songhu  LI Xiang  CHEN Xinbo  QIAO Ruiqing  DENG Xin  QIU Caisheng  GUO Yuan  HAO Dongmei  WANG Yufu
Abstract:
Keywords:flax  lignin  4CL gene  sequence analysis  RNA interference vector  transformation
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