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枸杞LbMYB103基因克隆及转化拟南芥的研究
引用本文:郑蕊,岳思君,王丽娟,钱贻崧,代金霞.枸杞LbMYB103基因克隆及转化拟南芥的研究[J].西北植物学报,2015,35(9):1722-1727.
作者姓名:郑蕊  岳思君  王丽娟  钱贻崧  代金霞
作者单位:(1 宁夏大学 生命科学学院,西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,银川 750021;2 南昌大学 转化医学研究院,南昌 330031)
基金项目:国家自然科学基金(31360361,31360025,31260065);2012年宁夏高等学校科学研究项目;宁夏自然科学基金(NZ13031)
摘    要:以枸杞品种‘宁杞1号’花药为材料,采用 RT-PCR技术,分离了R2R3类MYB基因LbMYB103包含完整开放阅读框(ORF)的cDNA片段,碱基序列与已知基因HQ415755完全一致。运用Gateway技术构建LbMYB103基因植物过表达载体pMDC83-LbMYB103,利用基因枪法将融合有绿色荧光蛋白(GFP)的过表达载体转入洋葱表皮细胞,将LbMYB103基因定位在细胞核。实时荧光定量PCR分析发现,LbMYB103基因在花药中优势表达,果实中表达量较低,在根、茎和叶中均未检测到其转录本,推测LbMYB103基因可能在花药发育过程中起重要作用。通过根癌农杆菌介导法将pMDC83-LbMYB103转入拟南芥(Col-0),经筛选获得T1代抗性再生植株52棵,PCR鉴定有41棵阳性植株,收获T1代种子,经抗性筛选获得T2代抗性植株29棵,PCR鉴定有23棵阳性植株。实时荧光定量PCR分析表明,LbMYB103在拟南芥植株的基因组中正常表达。表型观察发现T1和T2代拟南芥花药发育异常,花发育迟缓,果荚短小无种子,进一步表明LbMYB103可能与植物的育性有关。该结果为进一步开展枸杞遗传转化,深入研究LbMYB103基因在枸杞花药发育过程中可能发挥的调控功能奠定了基础。

关 键 词:枸杞  LbMYB103  植物过量表达载体  拟南芥  遗传转化

Cloning of LbMYB103 from Wolfberry and Transformation into Arabidopsis thaliana
ZHENG Rui,YUE Sijun,WANG Lijuan,QIAN Yisong,DAI Jinxia.Cloning of LbMYB103 from Wolfberry and Transformation into Arabidopsis thaliana[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2015,35(9):1722-1727.
Authors:ZHENG Rui  YUE Sijun  WANG Lijuan  QIAN Yisong  DAI Jinxia
Abstract:
Keywords:wolfberry(Lycium barbarum L  )  LbMYB103  plant over-expression vector  Arabidopsis thaliana  genetic transformation
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