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胡杨愈伤组织质膜的两相分离法及其H+-ATPase的特性
引用本文:杨颖丽,张峰,赵敏桂,谢能中,张立新.胡杨愈伤组织质膜的两相分离法及其H+-ATPase的特性[J].西北植物学报,2003,23(11):1877-1881.
作者姓名:杨颖丽  张峰  赵敏桂  谢能中  张立新
作者单位:1. 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所,沙漠与沙漠化重点实验室,兰州,730000;西北师范大学,生命科学学院,兰州,730070
2. 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所,沙漠与沙漠化重点实验室,兰州,730000
3. 兰州大学,生命科学学院,兰州,730000
4. 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所,沙漠与沙漠化重点实验室,兰州,730000;兰州大学,生命科学学院,兰州,730000
基金项目:中国科学院"百人计划"项目;中国科学院寒区旱区环境与工程研究所创新课题;全国百篇优秀博士学位论文专项基金(199924)项目
摘    要:以胡杨愈伤组织为材料,用PEG 3350/DextranT 500构成的两相系统提取质膜微囊,研究质膜H+-ATPase的特性.结果显示由6.3% PEG 3350、6.3% Dextran T500、KCl、磷酸缓冲液(pH 7.8)和蔗糖构成的两相系统提取膜微囊的H+-ATPase活性分别被Na3VO4、KNO3、NaN3抑制了约75%、2.6%和1.3%.方向性检测显示原位膜微囊占提取质膜微囊的90%,翻转膜微囊仅占10%.去垢剂对质膜H+-ATPase活性的影响说明0.015%的Triton X-100和0.01%~0.1%的Brij 58适用于测定质膜H+-ATPase活性.Lineweaver-Burk动力学分析该酶的Km值为0.65 mmol*L-1,Vmax为37.59 μmol Pi*mg-1 protein*h-1.研究结果表明两相法提取的质膜微囊主要是正向密闭的膜微囊;胡杨愈伤组织质膜H+-ATPase的最适pH为6.5,最适温度为37℃左右.

关 键 词:胡杨  愈伤组织  质膜  H^+-ATPase
文章编号:1000-4025(2003)11-1877-05
修稿时间:2003年5月6日

+-ATPase
Abstract:
Keywords:H+-ATPase
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