胡杨愈伤组织质膜的两相分离法及其H+-ATPase的特性 |
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引用本文: | 杨颖丽,张峰,赵敏桂,谢能中,张立新.胡杨愈伤组织质膜的两相分离法及其H+-ATPase的特性[J].西北植物学报,2003,23(11):1877-1881. |
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作者姓名: | 杨颖丽 张峰 赵敏桂 谢能中 张立新 |
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作者单位: | 1. 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所,沙漠与沙漠化重点实验室,兰州,730000;西北师范大学,生命科学学院,兰州,730070 2. 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所,沙漠与沙漠化重点实验室,兰州,730000 3. 兰州大学,生命科学学院,兰州,730000 4. 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所,沙漠与沙漠化重点实验室,兰州,730000;兰州大学,生命科学学院,兰州,730000 |
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基金项目: | 中国科学院"百人计划"项目;中国科学院寒区旱区环境与工程研究所创新课题;全国百篇优秀博士学位论文专项基金(199924)项目 |
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摘 要: | 以胡杨愈伤组织为材料,用PEG
3350/DextranT 500构成的两相系统提取质膜微囊,研究质膜H+-ATPase的特性.结果显示由6.3%
PEG 3350、6.3% Dextran T500、KCl、磷酸缓冲液(pH 7.8)和蔗糖构成的两相系统提取膜微囊的H+-ATPase活性分别被Na3VO4、KNO3、NaN3抑制了约75%、2.6%和1.3%.方向性检测显示原位膜微囊占提取质膜微囊的90%,翻转膜微囊仅占10%.去垢剂对质膜H+-ATPase活性的影响说明0.015%的Triton
X-100和0.01%~0.1%的Brij 58适用于测定质膜H+-ATPase活性.Lineweaver-Burk动力学分析该酶的Km值为0.65
mmol*L-1,Vmax为37.59 μmol Pi*mg-1 protein*h-1.研究结果表明两相法提取的质膜微囊主要是正向密闭的膜微囊;胡杨愈伤组织质膜H+-ATPase的最适pH为6.5,最适温度为37℃左右.
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关 键 词: | 胡杨 愈伤组织 质膜 H^+-ATPase |
文章编号: | 1000-4025(2003)11-1877-05 |
修稿时间: | 2003年5月6日 |
+-ATPase |
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Abstract: | |
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Keywords: | H+-ATPase |
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