| 地黄GGPPS1基因克隆及表达分析 |
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| 引用本文： | 赵 乐,史晶晶,马利刚,何庆祥,冯卫生,郑晓珂,朱畇昊.地黄GGPPS1基因克隆及表达分析[J].西北植物学报,2016,36(5):888-895. |
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| 作者姓名： | 赵 乐 史晶晶 马利刚 何庆祥 冯卫生 郑晓珂 朱畇昊 |
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| 作者单位： | （1 河南中医学院 药学院，郑州 450046；2 呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心，郑州 450046） |
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| 基金项目： | 国家“十二五”科技支撑计划（2011BAI06B02）； |
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| 摘 要： | 以地黄为材料，通过分析地黄转录组数据，设计特异性引物，克隆了地黄牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶（geranylgeranyl pyrophosphate synthase，GGPPS）基因的cDNA序列，命名为RgGGPPS1，GenBank登录号为KU258808。同时在生物信息学分析的基础上，进行原核表达、纯化以及组织特异性表达分析。结果显示：（1）RgGGPPS1基因开放阅读框为987 bp，编码328个氨基酸。（2）生物信息学分析结果显示，RgGGPPS1蛋白含有2个富含天冬氨酸的基序(DDXXXXDD和DDXXD)，与芝麻等双子叶植物中的GGPPS蛋白相似性较高。（3）利用构建的原核表达载体pET 32a RgGGPPS1在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达RgGGPPS1重组蛋白，采用Ni2+亲和层析得到了纯化的RgGGPPS1重组蛋白。（4）荧光定量PCR结果显示，RgGGPPS1基因在根中表达量最高，叶、茎中表达量较低。研究结果为进一步研究RgGGPPS1基因在地黄环烯醚萜苷生物合成途径中的功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 地黄 RgGGPPS1基因 生物信息学分析 原核表达 表达分析 |
Clone and Expression Analysis of GGPPS1 Gene from Rehmannia glutinosa |
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| ZHAO Le,SHI Jingjing,MA Ligang,HE Qingxiang,FENG Weisheng,ZHENG Xiaoke,ZHU Yunhao.Clone and Expression Analysis of GGPPS1 Gene from Rehmannia glutinosa[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2016,36(5):888-895. |
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| Authors: | ZHAO Le SHI Jingjing MA Ligang HE Qingxiang FENG Weisheng ZHENG Xiaoke ZHU Yunhao |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rehmannia glutinosa RgGGPPS1 gene bioinformatic analysis prokaryotic expression expression analysis |
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