‘云香’水仙ACC合成酶基因NtACS1的克隆及遗传转化 |
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引用本文: | 孙申申,温秀萍,杨菲颖,李梦思,李 欢,李 科,陈晓静.‘云香’水仙ACC合成酶基因NtACS1的克隆及遗传转化[J].西北植物学报,2017,37(2):250-257. |
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作者姓名: | 孙申申 温秀萍 杨菲颖 李梦思 李 欢 李 科 陈晓静 |
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作者单位: | (1 福建农林大学 园艺学院,福州 350002;2 福建农林大学 园艺植物遗传育种研究所,福州 350002;3 厦门大学 环境与生态学院,厦门 361102) |
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基金项目: | 福建省种业创新与产业化工程项目(K8114001B) |
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摘 要: | 为探究多花水仙ACS基因的序列特征及功能,以‘云香’水仙盛花期花瓣为试验材料,根据‘云香’水仙花朵转录组数据信息,通过RT-PCR方法克隆出1个ACS基因,命名为NtACS1(GenBank KX082936);NtACS1开放阅读框(ORF)长度为552bp,编码183个氨基酸。编码蛋白质分子量约为20.6KDa,理论等电点为6.30,不稳定系数为65.49,属于不稳定的疏水性蛋白。通过qRT-PCR对‘云香’水仙不同时期花瓣和副冠中的NtACS1基因进行了表达分析,得到与‘云香’水仙花朵转录组数据中相同的结果:NtACS1基因在‘云香’水仙花瓣和副冠中的表达都是随着花衰老过程呈现逐渐下降的趋势,且NtACS1基因在花瓣和副冠中的表达峰值都在花苞期,表明NtACS1基因编码的蛋白是在乙烯生物合成途径的系统1发挥催化作用的ACC合成酶。成功构建了NtACS1基因的正义植物表达载体,并通过农杆菌介导法获得8株转基因烟草,PCR和RT-PCR检测显示其中有6株为阳性植株,初步证实NtACS1基因已导入烟草基因组中且在烟草中已表达。该研究结果为进一步分析NtACS1基因的功能和后续转化水仙延长其花期研究奠定了基础。
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关 键 词: | ‘云香’水仙 基因克隆 表达分析 延长花期 ACS |
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