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甘蓝型油菜BnaCIPK15基因的表达分析与功能鉴定
引用本文:高世东,陈炳佑,张翰风,杨 博,刘舞贞,江元清.甘蓝型油菜BnaCIPK15基因的表达分析与功能鉴定[J].西北植物学报,2019,39(4):571-579.
作者姓名:高世东  陈炳佑  张翰风  杨 博  刘舞贞  江元清
作者单位:西北农林科技大学生命科学学院
基金项目:国家自然科学基金(31471153)
摘    要:CBL-CIPK是高等植物中广泛存在的一类解析Ca~(2+)信号的蛋白。该研究在前期工作基础上,对甘蓝型油菜(Brassica napus L.)的BnaCIPK15基因进行了亚细胞定位、双分子荧光互补(BiFC)、酵母双杂交和qRT-PCR检测等一系列分析,以探究BnaCIPK15蛋白在ABA激素响应中的作用。结果显示:(1)亚细胞定位发现,BnaCIPK15蛋白定位于细胞质和细胞核中; BiFC分析发现,BnaCIPK15蛋白与BnaCBL1/3/4/9蛋白之间的互作较强,与BnaCBL10仅有微弱互作。(2)qRT-PCR检测发现,BnaCIPK15基因受ABA和冷胁迫的诱导极显著上调表达,而对百草枯(Paraquat)、活性氧(H_2O_2)和热胁迫的诱导较弱,表明BnaCIPK15基因很可能参与ABA和冷胁迫的调控过程。(3)酵母滴定实验结果显示,BnaCIPK15蛋白与脱落酸(ABA)信号通路中的BnaHAB1蛋白(属于蛋白磷酸酶PP2C家族)存在明显的互作,而与BnaABFs/AREB3/ABI5转录因子无明显互作;BiFC验证显示,BnaCIPK15与BnaHAB1蛋白之间存在互作信号,而BnaCIPK15与BnaHAB2组合没有观察到信号,证明BnaCIPK15与BnaHAB1磷酸酶具有特异互作特征,推测BnaCIPK15可能参与调控ABA信号转导。研究认为,甘蓝型油菜中可能存在基于BnaCIPK15-BnaHAB1的互作模块,并参与ABA的信号转导和网络调控。

关 键 词:甘蓝型油菜  CIPK15蛋白  脱落酸  HAB1  ABFs  互作蛋白

Expression Analysis and Functional Identification of BnaCIPK15 Gene in Brassica napus L.
GAO Shidong,CHEN Bingyou,ZHANG Hanfeng,YANG Bo,LIU Wuzhen,JIANG Yuanqing.Expression Analysis and Functional Identification of BnaCIPK15 Gene in Brassica napus L.[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2019,39(4):571-579.
Authors:GAO Shidong  CHEN Bingyou  ZHANG Hanfeng  YANG Bo  LIU Wuzhen  JIANG Yuanqing
Abstract:
Keywords:Brassica napus  CIPK15 protein  ABA  HAB1  ABFs  interacting proteins
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