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雪莲愈伤组织蛋白质提取及双向电泳分析
引用本文:金德善,卢存福,兰小中,刘雪萍,乔 佩,李红英,陈玉珍.雪莲愈伤组织蛋白质提取及双向电泳分析[J].西北植物学报,2012,32(9):1903-1909.
作者姓名:金德善  卢存福  兰小中  刘雪萍  乔 佩  李红英  陈玉珍
作者单位:1. 北京林业大学生物科学与技术学院,北京林业大学林木育种国家工程实验室,林木花卉遗传育种教育部重点实验室,北京100083
2. 西藏大学,西藏农牧学院,西藏林芝860000
基金项目:国家科技支撑计划项目(2011BAI13B06);北京市自然科学基金(6112016)
摘    要:以产自西藏绵头雪莲为材料,分别采用TCA/丙酮法、尿素法和酚法,提取雪莲愈伤组织蛋白质并进行双向电泳,对蛋白产量和纯度以及电泳图谱进行比较。结果表明:(1)酚法较TCA/丙酮法和尿素法获得的蛋白质更纯,杂质少,蛋白点多且分辨率较高,在二维电泳图谱中背景清晰,横纹和纵纹较少。(2)对酚法提取的蛋白质样品进行上样量的比较结果显示,17cm胶条500μg上样量二维图谱的背景和蛋白点分布较好。(3)用0℃处理雪莲愈伤组织12h,利用建立的双向电泳体系分析结果发现,有33个蛋白点比常温(23℃)上调1.5倍表达,有5个蛋白点的表达下调2倍。(4)质谱鉴定结果表明,低温诱导的蛋白包括NADP-依赖型异柠檬酸脱氢酶、腺苷高半胱氨酸酶、抗性RPP8类蛋白、蛋白点gi|13129470、α-微管蛋白,分别与新陈代谢、植物防御、能量代谢、细胞的结构蛋白相关。

关 键 词:雪莲  双向电泳  样品制备  蛋白质组

Analysis of Proteome Changes in Cold-acclimated Saussurea involucrata Callus by an Improved Efficient Protein Extraction Method
JIN De shan,LU Cun fu,LAN Xiao zhong,LIU Xue ping,QIAO Pei,LI Hong ying,CHEN Yu zhen.Analysis of Proteome Changes in Cold-acclimated Saussurea involucrata Callus by an Improved Efficient Protein Extraction Method[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2012,32(9):1903-1909.
Authors:JIN De shan  LU Cun fu  LAN Xiao zhong  LIU Xue ping  QIAO Pei  LI Hong ying  CHEN Yu zhen
Institution:1(1 College of Biological Sciences and Biotechnology,National Engineering Laboratory for Tree Breeding,Key Laboratory of Genetics and Breeding in Forest Trees and Ornamental Plants,Ministry of Education,Beijing Forestry University,Beijing 100083,China;2 Agricultural and Animal Husbandry College,Tibet University,Linzhi,Tibet 860000,China)
Abstract:
Keywords:Saussurea involucrata  two-dimensional electrophoresis  sample preparation  proteome
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