茶树CsbHLH71基因克隆及转录活性分析 |
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引用本文: | 吴应奇,宋小凤,邓见田烨,白思蕾,李娟,王坤波.茶树CsbHLH71基因克隆及转录活性分析[J].西北植物学报,2023(1):37-44. |
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作者姓名: | 吴应奇 宋小凤 邓见田烨 白思蕾 李娟 王坤波 |
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作者单位: | 1.湖南农业大学教育部茶学重点实验室410128;2.湖南农业大学国家植物功能成分利用工程技术研究中心410128;3.湖南农业大学农业农村部园艺作物基因资源评价利用重点实验室410128; |
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基金项目: | 国家自然科学基金(32072629,32172217和32002095);湖南省自然科学基金优秀青年科学基金(2022JJ20028);长沙市杰出创新青年培养计划(kq2107015);中央引导地方科技发展项目(2021QZY035)。 |
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摘 要: | bHLH转录因子在植物类黄酮代谢过程中具有重要调控作用。该研究采用PCR方法,从‘碧香早’茶树中获得了与儿茶素含量高度负相关的CsbHLH71基因,并对其进行生物信息学分析、亚细胞定位及转录活性分析,为探究CsbHLH71基因在调控茶树儿茶素生物合成的分子机制奠定基础。结果表明:(1)通过RNA-seq测序筛选成功获得一个茶树CsbHLH71基因,该基因CDS序列全长912 bp,编码303个氨基酸;氨基酸序列第101-160位含有一个碱性螺旋-环-螺旋保守结构域,属于bHLH家族转录因子;序列对比和系统进化树结果显示,其与杜鹃花、河滨葡萄等物种的bHLH氨基酸序列有较高的相似性。(2)qRT-PCR结果显示,不同浓度微生物肥处理下茶树CsbHLH71基因的表达水平显著上调,且在1000倍处理下效果最显著,说明高浓度的微生物肥能促进茶树CsbHLH71基因的表达。(3)亚细胞定位分析表明CsbHLH71蛋白定位在细胞核。(4)转录活性分析发现,茶树CsbHLH71蛋白在酵母和烟草中均具有转录抑制活性,为转录抑制子,证实了CsbHLH71蛋白具有转录抑制剂的功能。研究推测,CsbHLH7...
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关 键 词: | 茶树 bHLH 亚细胞定位 转录活性分析 |
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