| 龙眼体胚发生过程生长素响应因子DlARF5a的克隆及表达分析 |
| |
| 引用本文： | 林丽霞,屈 莹,徐 洋,林玉玲,赖钟雄.龙眼体胚发生过程生长素响应因子DlARF5a的克隆及表达分析[J].西北植物学报,2014,34(6):1075-1082. |
| |
| 作者姓名： | 林丽霞 屈 莹 徐 洋 林玉玲 赖钟雄 |
| |
| 作者单位： | (福建农林大学 园艺植物生物工程研究所,福州 350002) |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(31201614,31071787);高等学校博士学科点专项科研基金(20123515120008);福建省重大科技平台建设(2008N2001) |
| |
| 摘 要： | 以龙眼松散型胚性愈伤组织为材料,采用RT-PCR和RACE技术克隆获得生长素响应因子ARF5acDNA全长序列,利用实时荧光定量法检测其在龙眼体胚不同发育时期的转录水平,并将其与绿色荧光蛋白(GFP)构建成亚细胞定位载体侵染洋葱表皮细胞。结果表明:龙眼ARF5a(命名为DlARF5a,GenBank登录号为KF739401)的cDNA序列全长为3 322bp,其中开放阅读框为2 829bp,212bp 5′非编码区,258bp 3′非编码区,编码942个氨基酸。生物信息学预测显示,DlARF5a编码蛋白具有B3、Auxin-resp和AUX-IAA保守区与结构功能域,中间区域富含谷甘氨酸、丝氨酸和亮氨酸,是一个定位于细胞质的具有促进转录活性功能的水溶性蛋白。系统进化树分析表明,该基因编码的氨基酸序列与大豆的亲缘关系最近。qRT-PCR检测显示,DlARF5a在龙眼球形胚和鱼雷形胚时期表达显著增强,而在6个发育阶段中子叶形胚的表达量最低,推测DlARF5a参与龙眼体胚中鱼雷胚时期的形态建成。共聚焦显微镜观察结果显示,未添加外源生长素IAA的DlARF5a蛋白定位于细胞质中,而经外源生长素处理的DlARF5a蛋白在细胞膜、细胞质和细胞核中均有表达,推测龙眼生长素响应蛋白DlARF5a能够响应外源生长素IAA而改变其在细胞中的空间位置。
|
| 关 键 词： | 龙眼 体细胞胚胎发生 生长素响应因子 生物信息学 实时荧光定量PCR 亚细胞定位 |
Cloning and Expression Analysis of DlARF5a in the Process of Somatic Embryogenesis in Dimocarpus longan Lou. |
| |
| LIN Lixi,QU Ying,XU Yang,LIN Yuling,LAI Zhongxiong.Cloning and Expression Analysis of DlARF5a in the Process of Somatic Embryogenesis in Dimocarpus longan Lou.[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2014,34(6):1075-1082. |
| |
| Authors: | LIN Lixi QU Ying XU Yang LIN Yuling LAI Zhongxiong |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《西北植物学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《西北植物学报》下载免费的PDF全文 |
|
