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胡杨愈伤组织质膜的两相分离法及其H~+-ATPase的特性
引用本文:杨颖丽,张峰,赵敏桂,谢能中,张立新.胡杨愈伤组织质膜的两相分离法及其H~+-ATPase的特性[J].西北植物学报,2003,23(11).
作者姓名:杨颖丽  张峰  赵敏桂  谢能中  张立新
作者单位:中国科学院寒区旱区环境与工程研究所沙漠与沙漠化重点实验室,中国科学院寒区旱区环境与工程研究所沙漠与沙漠化重点实验室,中国科学院寒区旱区环境与工程研究所沙漠与沙漠化重点实验室,兰州大学生命科学学院,中国科学院寒区旱区环境与工程研究所沙漠与沙漠化重点实验室 兰州730000西北师范大学生命科学学院兰州730070,兰州730000,兰州730000,兰州730000,兰州730000兰州大学生命科学学院兰州730000
基金项目:中国科学院"百人计划"项目,中国科学院寒区旱区环境与工程研究所创新课题,全国百篇优秀博士学位论文专项基金(199924)项目
摘    要:以胡杨愈伤组织为材料,用PEG3350/DextranT500构成的两相系统提取质膜微囊,研究质膜H+-AT-Pase的特性。结果显示:由6.3%PEG3350、6.3%DextranT500、KCl、磷酸缓冲液(pH7.8)和蔗糖构成的两相系统提取膜微囊的H+-ATPase活性分别被Na3VO4、KNO3、NaN3抑制了约75%、2.6%和1.3%。方向性检测显示原位膜微囊占提取质膜微囊的90%,翻转膜微囊仅占10%。去垢剂对质膜H+-ATPase活性的影响说明0.015%的TritonX-100和0.01%~0.1%的Brij58适用于测定质膜H+-ATPase活性。Lineweaver-Burk动力学分析该酶的Km值为0.65mmol·L-1,Vmax为37.59μmolPi·mg-1protein·h-1。研究结果表明:两相法提取的质膜微囊主要是正向密闭的膜微囊;胡杨愈伤组织质膜H+-ATPase的最适pH为6.5,最适温度为37℃左右。

关 键 词:胡杨  愈伤组织  质膜  H+-ATPase

Isolation of plasma membrane from Populus euphratica by two-phases partition and properties of its H~+-ATPase
YANG Ying-li,ZHANG Feng,ZHAO Min-gui,XIE Neng-zhong,ZHANG Li-xin,tal and Engineering Research Institude,Chinese Academy of Science,Lanzhou,Chin,School of Life Science,Lanzhou University,Lanzhou,Chin,School of Life Science.Isolation of plasma membrane from Populus euphratica by two-phases partition and properties of its H~+-ATPase[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2003,23(11).
Authors:YANG Ying-li  ZHANG Feng  ZHAO Min-gui  XIE Neng-zhong  ZHANG Li-xin  tal and Engineering Research Institude  Chinese Academy of Science  Lanzhou  Chin  School of Life Science  Lanzhou University  Lanzhou  Chin  School of Life Science
Institution:YANG Ying-li~1,3,ZHANG Feng~1,ZHAO Min-gui~1,XIE Neng-zhong~2,ZHANG Li-xin~1,2*tal and Engineering Research Institude,Chinese Academy of Science,Lanzhou 730000,China,2 School of Life Science,Lanzhou University,Lanzhou 730000,China,3 School of Life Science,Northwest Normal University,Lanzhou 730070,China)
Abstract:
Keywords:Populus euphratica  callus  plasma membrane  H~+-ATPase
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