| 龙眼体胚发生过程中DlAGO4基因的克隆及表达分析 |
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| 引用本文： | 陈荣珠,申 序,林美珍,陈晓慧,徐小萍,赖钟雄.龙眼体胚发生过程中DlAGO4基因的克隆及表达分析[J].西北植物学报,2020,40(5):747-755. |
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| 作者姓名： | 陈荣珠 申 序 林美珍 陈晓慧 徐小萍 赖钟雄 |
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| 作者单位： | (1 漳州卫生职业学院 药学系，福建漳州 363000；2 福建农林大学园艺植物生物工程研究所，福州 350002) |
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| 基金项目： | 漳州卫生职业学院科技创新团队培育项目(Kjcx 3); |
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| 摘 要： | 该研究基于龙眼基因组数据库,采用RT-PCR技术,以‘红核子’品种龙眼松散型胚性愈伤组织cDNA为模板,进行龙眼胚性愈伤组织DlAGO4基因的克隆和生物信息学分析,并采用实时荧光定量技术分析其在龙眼体细胞胚胎发生不同阶段、不同组织部位、激素和非生物胁迫处理以及5-氮胞苷(5-azac)处理的表达模式。结果表明:(1)DlAGO4基因cDNA全长为3 425 bp,包含开放阅读框长度为2 781 bp,编码926个氨基酸。(2)生物信息学分析表明,DlAGO4蛋白为碱性亲水非分泌蛋白,含有AGO经典的保守结构域PAZ和Piwi,与克莱门柚CcAGO4的同源性最近,含有85个磷酸化位点和2个糖基化位点;亚细胞定位预测其最可能定位于细胞核;MicroRNA预测显示,DlAGO4基因受到4个miRNA靶向调控。(3)qRT-PCR结果表明,DlAGO4在龙眼球形胚阶段和种子中相对表达量最高;激动素、水杨酸、NaCl、甘露醇、PEG-4000和ABA处理均能促进DlAGO4基因的表达,而2,4-D和MeJA处理抑制其表达;不同浓度的5-azac处理1 d和3 d抑制DlAGO4的表达,但从处理第6天开始该基因呈上调表达,并于处理第12天相对表达量最高。研究认为,DlAGO4基因可能参与龙眼球形胚和种子的转录调控,且可能参与KT、SA的激素信号转导途径和NaCl、甘露醇、PEG-4000、ABA的逆境胁迫响应途径以及DNA甲基化调控机制。
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| 关 键 词： | 龙眼体胚发生 AGO4 激素响应 非生物胁迫 5 氮胞苷 实时荧光定量PCR |
Cloning and Expression Analysis of DlAGO4 Gene from Embryogenic Callus in Dimocarpus longan Lour. |
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| CHEN Rongzhu,SHEN Xu,LIN Meizhen,CHEN Xiaohui,XU Xiaoping,LAI Zhongxiong.Cloning and Expression Analysis of DlAGO4 Gene from Embryogenic Callus in Dimocarpus longan Lour.[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2020,40(5):747-755. |
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| Authors: | CHEN Rongzhu SHEN Xu LIN Meizhen CHEN Xiaohui XU Xiaoping LAI Zhongxiong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | longan somatic embryogenesis AGO4 hormone response abiotic stress 5 azac real time quantitative PCR |
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