| 菘蓝IiEMF基因的克隆与功能分析 |
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| 引用本文： | 白 钰,唐晓清,王芳权,王莉莉,张轩毓,杨 杰.菘蓝IiEMF基因的克隆与功能分析[J].西北植物学报,2020,40(1):1-9. |
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| 作者姓名： | 白 钰 唐晓清 王芳权 王莉莉 张轩毓 杨 杰 |
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| 作者单位： | (1 南京农业大学 园艺学院， 南京 210095；2 江苏省农科院粮食作物研究所， 南京 210014) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31171486)； |
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| 摘 要： | 该研究以菘蓝(Isatis indigotica Fort.)转录组数据为基础,克隆得到菘蓝EMF基因的cDNA全长,命名为IiEMF。(1)序列分析表明,IiEMF基因开放阅读框长度为1896 bp,编码631个氨基酸。进化树分析表明,菘蓝IiEMF蛋白与甘蓝(Brassica oleracea)EMF蛋白亲缘关系最为接近。(2)实时定量PCR结果显示,IiEMF在菘蓝不同器官中均有表达,且在叶中表达量最高,果实中表达量最低;IiEMF基因在菘蓝抽薹开花过程中叶内的表达量呈先升后降的趋势,并于初花期表达量达到最高后逐渐降低回落;在花/果期IiEMF基因表达量较花蕾中明显降低。(3)成功构建了超表达载体pCAMBIA1300-EMF,经农杆菌介导侵染拟南芥,PCR鉴定表明,有7株为超表达转IiEMF基因植株。(4)表型观察发现,在长日照和短日照条件下,与野生型相比2个转IiEMF基因拟南芥株系的开花时间都明显较早(提前6~10 d),且转IiEMF基因株系的莲座叶数比野生型多10片以上,叶片也比野生型大而肥厚。(5)qRT-PCR检测结果显示,在拟南芥营养生长过程中,过表达IiEMF显著抑制了拟南芥AtAP1、AtCO和AtLFY的表达,而促进了AtFLC的表达;当拟南芥开花时,转基因株系中的AtAP1和AtFLC表达量均高于野生型,AtCO和AtLFY的表达量显著低于野生型。研究表明,过量表达IiEMF基因能够促使拟南芥提前开花,且IiEMF可能是通过影响多种开花途径来共同调节促进拟南芥的早花。
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| 关 键 词： | 菘蓝 IiEMF基因 基因克隆 过表达 开花 |
Cloning and Functional Analysis of IiEMF Gene in Isatis indigotica Fort. |
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| BAI Yu,TANG Xiaoqing,WANG Fangquan,WANG Lili,ZHANG Xuanyu,YANG Jie.Cloning and Functional Analysis of IiEMF Gene in Isatis indigotica Fort.[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2020,40(1):1-9. |
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| Authors: | BAI Yu TANG Xiaoqing WANG Fangquan WANG Lili ZHANG Xuanyu YANG Jie |
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| Institution: | (College of Horticulture, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095,China;2Institute of Food Crops, Jiangsu Academy Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Isatis indigotica Fort IiEMF gene gene cloning overexpression flowering |
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