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脱落酸的酶标免疫测定
引用本文:季本仁,段金玉.脱落酸的酶标免疫测定[J].云南植物研究,1986(2).
作者姓名:季本仁  段金玉
作者单位:中国科学院昆明植物研究所 (季本仁),中国科学院昆明植物研究所(段金玉)
摘    要:使用国产辣根过氧化物酶(HRP)合成酶标记物,用竞争法进行了植物内源激素脱落酸(ABA)的酶标免疫测定研究。测定范围为0.0125ng—100ng,在此范围内logitB/B。与ABA浓度的对数之间呈较好的线性关系。检测的灵敏度达到5×10~(-14)克分子。比较了两种酶标记方法对于测定的影响,结果发现直接使ABA共价结合到HRP上形成ABA-HRP酶标记物比先将ABA与牛血清白蛋白(BSA)结合后,然后进一步再与HRP反应形成ABA—BSA—HRP复合物灵敏度高,非特异性吸附小,而且合成步骤较少。酶标记物的稀释度直接影响测定的灵敏度和浓度对数与logit B/B。之间的线性关系好坏;在以每毫升3—6微克免疫球蛋白包埋免疫吸附板进行测定时,用每毫升5微克酶标记物的浓度获得了最佳结果。

关 键 词:脱落酸  酶标免疫测定  辣根过氧化物酶

AN ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY (ELISA) FOR ABSCISIC ACID
Ji Benren,Duan Jinyu.AN ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY (ELISA) FOR ABSCISIC ACID[J].Acta Botanica Yunnanica,1986(2).
Authors:Ji Benren  Duan Jinyu
Abstract:We have developed an enzyme-linked immunosorbenf assay for quantitative analysis of abscisic acid (ABA) by coupling horseradish peroxi-dase(HRP)to ABA directly as an enzyme conjugate. The sensitivity of the assay, 50 f mol, is comparable to the radioimmunoassay and the established methods using alkaline phosphatase (AP) -ABA or ABA-bovinerserum albumin-AP as the enzyme conjugate. The logit B/B0 value was linear between 12.5pg to 100 ng. For improving assay sensitivity and precision, we have also approached some experimental conditions including the selection of proper immunization scheduler, injection doses and route, enzyme conjugate concentration, and the dilution of antibody against ABA.
Keywords:ABA  ELISA  HRP  
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