| 非洲菊基因组DNA提取及ISSR-PCR扩增模板浓度优化 |
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| 引用本文： | 李宗菊,熊丽,桂敏,李金泽,刘小莉,刘飞虎.非洲菊基因组DNA提取及ISSR-PCR扩增模板浓度优化[J].云南植物研究,2004,26(4):439-444. |
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| 作者姓名： | 李宗菊 熊丽 桂敏 李金泽 刘小莉 刘飞虎 |
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| 作者单位： | 1. 云南大学生物技术系,云南,昆明,650091
2. 云南省农业科学院园艺研究所,云南,昆明,650205 |
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| 基金项目： | 云南省科技攻关项目资助 (2 0 0 1，NG13) |
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| 摘 要： | 以改良的CTAB法为基础，对非洲菊基因组DNA提取进行了下述优化：在第二次用氯仿，异戊醇抽提时，加入“PCN”溶液(0.0675g PVP，45μl 10％ CTAB 4％NaCl)，可明显去除多糖；在材料研磨时加入化学物质M(0.1000g Na2SO3，0.0500g Vc)及N(0.0200gVE，0.1000gNa2B4O7，0.0200gPVP，200μlB-巯基乙醇)，都可去除酚类物质，明显提高DNA及ISSR-PCR扩增的质量，但N的效果稍优于M；同时加入M、N及“PCN”，具有明显的优化效果，所提5个样品DNA，平均A260/A280、A260/A230分别为1.81、2.02，浓度为0.649μg/μl，片段大小约为49kb，ISSR扩增带多且清晰、明亮、稳定性及多态性高，表明DNA纯度很高。对扩增反应的最佳模板浓度进行研究表明，所提DNA模板必须稀释30倍(浓度为15～30μg/μl时)，才能扩增出清晰的谱带。
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| 关 键 词： | 非洲菊 DNA提取 模板浓度 |
| 文章编号： | 0253-2700(2004)04-0439-06 |
| 修稿时间： | 2003年12月18 |
Optimization of the Genomic DNA Extraction and Concentration of DNA Template for ISSR-PCR Amplification of Gerbera jamesonii Cultivars |
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| LI Zong-Ju,XIONG Li,GUI Ming,LI Jin-Zei,LIU Xiao-Li,LIU Fei-Hu.Optimization of the Genomic DNA Extraction and Concentration of DNA Template for ISSR-PCR Amplification of Gerbera jamesonii Cultivars[J].Acta Botanica Yunnanica,2004,26(4):439-444. |
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| Authors: | LI Zong-Ju XIONG Li GUI Ming LI Jin-Zei LIU Xiao-Li LIU Fei-Hu |
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| Institution: | LI Zong-Ju~1,XIONG Li~2,GUI Ming~2,LI Jin-Zei~2,LIU Xiao-Li~1,LIU Fei-Hu~ |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gerbera jamesonii DNA extraction Template concentration |
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