红花细胞培养中高产α—生育酚克隆系的筛选

为了从红花(Carthamus tinctorius L.)培养细胞中筛选到具有高产α-生育酚性能的细胞变异体,利用细胞平板培养技术,利用HPLC法测定培养细胞中α-生育酚的含量,对200多个由单细胞或小细胞团发育而来的细胞克隆进行了筛选。结果发现,在细胞生长速率和α-生育酚含量上,这些克隆之间存在着显著的差异。在克隆的第一代分析过程中,发现α-生育酚含量由0—138.9μg/gDW变化;细胞生产速率由0.20—0.53gDW/1.d变化。细胞生长速率与α-生育酚含量之间无明显相关性。对一些α-生育酚含量较高的克隆进行了稳定性观察,经近20代继代培养观察后,从中筛选到一个合成α-生育酚较稳定的高产克隆系(CT-289),其α-生育酚平均含量为114.4μg/gDW,是原始株系(15.83μg/gDW)的7.2倍;其生长速率为0.424gDW/1.d,与原始株系(0.417gDW/l.d)相差不大。