黄芪UGPase cDNA克隆、分析及其在大肠杆菌中的表达 |
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引用本文: | 吴晓俊,杜旻,翁颖琦,刘涤,胡之璧.黄芪UGPase cDNA克隆、分析及其在大肠杆菌中的表达[J].Journal of Integrative Plant Biology,2002,44(6). |
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作者姓名: | 吴晓俊 杜旻 翁颖琦 刘涤 胡之璧 |
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作者单位: | 上海中医药研究院中药研究所,上海,200032 |
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摘 要: | 在已报道的UGPase的植物cDNA序列基础上,从膜荚黄芪( Astragalus membranaceus (Fisch.) Bunge)毛状根中分离了此酶的cDNA.此cDNA全长为1 831 bp,推测编码分子量为51.5 kD、等电点为6.01的由471个氨基酸残基组成的多肽.将此cDNA的开放阅读框载入质粒pET28(a)+并转入大肠杆菌( Escherichia coli ) BL21.SDS-PAGE表明此酶已经在 E.coli 中获得大量表达,表达量约为总细菌蛋白的40%.酶活分析表明,转化菌中UGPase 的活性比非转化菌高0.50~3.27倍,证明此cDNA可以在原核生物中获得表达.Northern blot表明UGPase在黄芪的根、茎、叶及毛状根中均有表达,在根及毛状根中表达量较高,证明了此酶主要分布于植物贮藏组织的报道.
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关 键 词: | 原核表达 cDNA克隆 毛状根 膜荚黄芪 |
UGPase of Astragalus membranaceus :cDNA Cloning,Analyzing and Expressing in Escherichia coli |
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Authors: | WU Xiao-Jun DU Min WENG Ying-Qi LIU Di HU Zhi-bi |
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Abstract: | |
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Keywords: | UGPase prokaryotic expression cDNA cloning UGPase hairy root Astragalus membranaceus |
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