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Bloom解旋酶突变体的克隆与表达
引用本文:张金彪,许厚强,骆衡,许庆贺,陈祥,李坤.Bloom解旋酶突变体的克隆与表达[J].生物技术通报,2013(1):123-128.
作者姓名:张金彪  许厚强  骆衡  许庆贺  陈祥  李坤
作者单位:贵州大学生命科学学院;贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室动物科学学院;贵州大学贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室动物科学学院
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目(2010CB534912);教育部博士点基金资助项目(200806570003);贵州省国际科技合作计划项目[黔科合外G字(2011)7008号];贵州省优秀人才省长资金资助项目(200822)
摘    要:blm基因的突变可导致Bloom综合症(BS),Bloom综合症是一种罕见隐性常染色体遗传疾病,患者遗传不稳定并易患多种类型癌症。临床发现BS患者细胞中的BLM的RecQ-Ct区域的1 036位半胱氨酸残基发生突变。运用生物信息学及分子生物学技术,通过两轮重组PCR,构建985位和1 036位氨基酸突变的BLM解旋酶多点突变基因,克隆到载体pET-28a中,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。分离纯化获得了高纯度(>95%)的双突变型BLM解旋酶,并对其进行了Western blotting鉴定。这些结果可为进一步研究BS的致病机制奠定基础。

关 键 词:BLM解旋酶  重组PCR  多位点突变  基因克隆表达

Cloning and Expression of Bloom Helicase Mutant
Zhang Jinbiao,Xu Houqiang,Luo Heng,Xu Qinghe,Chen Xiang,Li Kun.Cloning and Expression of Bloom Helicase Mutant[J].Biotechnology Bulletin,2013(1):123-128.
Authors:Zhang Jinbiao  Xu Houqiang  Luo Heng  Xu Qinghe  Chen Xiang  Li Kun
Institution:1,2,3(1.College of Life Science,Guizhou University,Guiyang 550025;2.Key Laboratory of Animal Genetics,Breeding and Reproduction in the Plateau Mountainous Region,Ministry of Education,College of Animal Science,Guizhou University,Guiyang 550025;3.Guizhou Key Laboratory of Animal Genetics,Breeding Reproduction,College of Animal Science,Guizhou University,Guiyang 550025)
Abstract:
Keywords:
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