| 日本结缕草总RNA提取和mRNA分离方法的优化 |
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| 引用本文： | 代小梅,程晓霞,曾会明,韩烈保.日本结缕草总RNA提取和mRNA分离方法的优化[J].生物技术通报,2010(12). |
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| 作者姓名： | 代小梅 程晓霞 曾会明 韩烈保 |
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| 作者单位： | 1. 北京林业大学草坪研究所,北京,100083
2. 北京林业大学草坪研究所,北京,100083;长江大学园艺园林学院,荆州,434025 |
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| 基金项目： | 国家“863”计划(2006AA10Z132); “十一五”国家科技支撑项目(2006BAD01A19,2006BAC18B04-1); 北京市重点实验室和北京市重点学科专项 |
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| 摘 要： | 介绍了分别以日本结缕草根部、叶部、匍匐茎等为材料的总RNA提取的改良步骤,质量和浓度检测及其注意事项,并采用Promega公司的Poly ATract Systems Ⅲ(Z5300)试剂盒进行mRNA分离,尽管这一方法成熟可行,但仍存在洗脱体积较大,常需先沉淀浓缩后才能进行后续试验(如cDNA合成),在制备少量mRNA时回收率较低等问题。据此,对mRNA分离方法作了改良,介绍了mRNA分离的优化步骤,通过增加体系形成了一种更适合于日本结缕草mRNA分离的方法,从而为日本结缕草的分子生物学研究提供基础资料。结果证明所提取的总RNA和mRNA完整,质量较高,并应用到日本结缕草cD-NA文库的构建。
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| 关 键 词： | 日本结缕草 总RNA mRNA分离 |
The Optimization of Total RNA Extraction and mRNA Isolation from Zoysiagrass(Zoysia japonica) |
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| Dai Xiaomei,Cheng Xiaoxia,Zeng Huiming,Han Liebao.The Optimization of Total RNA Extraction and mRNA Isolation from Zoysiagrass(Zoysia japonica)[J].Biotechnology Bulletin,2010(12). |
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| Authors: | Dai Xiaomei Cheng Xiaoxia Zeng Huiming Han Liebao |
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| Institution: | Dai Xiaomei 1 Cheng Xiaoxia 1 Zeng Huiming1 Han Liebao1,2(1Institute of Turfgrass Science of Beijing Forestry University,Beijing 100083,2College of Gardening and Horticulture of Yangtze University,Jingzhou 434025) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Zoysia japonica Total RNA mRNA isolation |
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