| 人胰高糖素样肽-1及其突变体在大肠杆菌BL21中的表达与生物活性研究 |
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| 引用本文： | 窦文芳,张莲芬,雷楗勇,张立操,陈蕴,金坚.人胰高糖素样肽-1及其突变体在大肠杆菌BL21中的表达与生物活性研究[J].生物技术通报,2008(6). |
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| 作者姓名： | 窦文芳 张莲芬 雷楗勇 张立操 陈蕴 金坚 |
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| 作者单位： | 江南大学医药学院制药细胞与分子药理实验室,无锡,214122 |
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| 基金项目： | 863探索类项目
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江苏省六大人才高峰计划
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| 摘 要： | 以人胰高糖素样肽-1（human glucagons-like peptide-1,GLP-1））为研究对象,以克隆载体pPblu2SKP/（GLP-1A2G）2基因为模板,利用PCR扩增获得GLP-1与其突变体GLP-1A2G的编码基因,并将其插入原核表达质粒pGEX-4T-1中,利用氯化钙法将其转入表达宿主大肠杆菌（Escherichia coli）BL21（DE3）中诱导表达,经IPTG诱导后,收集菌体。菌体经超声破碎后,裂解液用GST亲和层析纯化得到融合蛋白,经凝血酶酶解,用Superdex G-75凝胶层析,得到GLP-1及其突变体GLP-1A2G的样品,经SDS-PAGE电泳测定,样品纯度〉90%。小鼠糖耐量试验表明,相对于空白对照组而言,GLP-1及其突变体GLP-1A2G可以明显地控制血糖的水平,两者的生物活性并无明显差异。由于突变体GLP-1A2G较GLP-1可以更加有效的抵制DPPⅣ的降解,提示突变体GLP-1A2G较GLP-1在白蛋白融合或PEG修饰等方面具有更大的优势。
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| 关 键 词： | 人胰高糖素样肽-1 突变体 表达 生物活性 |
Expression of Human Glucagon-like Peotide-1 and Human Glucagon-like Peotide-1 Mutant Gene in BL21 |
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| Dou Wenfang,Zhang Lianfang,Lei Jianyong,Zhang Licao,Chen Yun,Jin Jian.Expression of Human Glucagon-like Peotide-1 and Human Glucagon-like Peotide-1 Mutant Gene in BL21[J].Biotechnology Bulletin,2008(6). |
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| Authors: | Dou Wenfang Zhang Lianfang Lei Jianyong Zhang Licao Chen Yun Jin Jian |
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