| 锁阳ISSR-PCR反应体系的优化研究 |
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| 引用本文： | 李伟,刘广达,陈青,呼思勒,陈贵林.锁阳ISSR-PCR反应体系的优化研究[J].生物技术通报,2012(8):135-140. |
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| 作者姓名： | 李伟 刘广达 陈青 呼思勒 陈贵林 |
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| 作者单位： | 1. 内蒙古大学生命科学学院,呼和浩特,010021
2. 暨南大学生命科学技术学院,广州,510632 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划项目，内蒙古科技创新引导奖励资金项目 |
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| 摘 要： | 通过单因素试验、正交试验的方法,对影响锁阳ISSR-PCR反应体系的7种主要因素在3个水平上进行优化筛选,得到锁阳ISSR-PCR反应的最佳体系:25μL反应体系中含有0.2 mmol/L dNTP、1.5 mmol/L Mg2+、10μmol/L引物、50 ng模板DNA、2.0 UTaq酶、1%去离子甲酰胺和2.5μg/μL牛血清白蛋白。相应引物的最佳退火温度为48.9℃。这一体系的建立为今后利用ISSR-PCR标记技术研究锁阳的遗传多样性奠定了基础。同时对ISSR-PCR体系中添加剂的作用进行了探讨,为添加剂在其他植物ISSR-PCR反应中的应用提供借鉴。
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| 关 键 词： | 锁阳 正交设计 ISSR 优化 |
Optimization of ISSR-PCR System of Cynomorium songaricum Rupr. |
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| Li Wei
,
Liu Guangda
,
Chen Qing
,
Hu Sile
,
Chen Guilin.Optimization of ISSR-PCR System of Cynomorium songaricum Rupr.[J].Biotechnology Bulletin,2012(8):135-140. |
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| Authors: | Li Wei Liu Guangda Chen Qing Hu Sile Chen Guilin |
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| Institution: | 1(1College of Life Science,Inner Mongolia University,Hohhot 010021;2College of Life Science and Technology,Jinan Univerisity, Guangzhou 510632) |
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| Abstract: | Seven impact factors affecting ISSR-PCR reaction system were optimized in ISSR-PCR system of C.songaricum to lay a foundation for studying genetic diversity of C.songaricum germplasm resources.The results showed that the best ISSR-PCR system of C.songaricum is 25 μL reaction system including 0.2 mmol/L dNTP,1.5 mmol/L Mg2+,10 μmol/L primer,50 ng DNA template,2.0 U Taq enzyme,1.0% formamide deionized and 2.5 μg/μL albumin bovine the best annealing temperature is 48.9℃.This research also discussed function of some additive chemicals in ISSR-PCR systerm. |
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| Keywords: | Cynomorium songaricum Rupr Orthogonal ISSR Optimization |
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