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铜绿假单胞菌荧光实时定量PCR标准品的构建
引用本文:孙飞龙,邱志刚,金敏,郭向飞,王新为,吴道澄,李君文.铜绿假单胞菌荧光实时定量PCR标准品的构建[J].生物技术通报,2009(10).
作者姓名:孙飞龙  邱志刚  金敏  郭向飞  王新为  吴道澄  李君文
作者单位:1. 西安交通大学生命科学与技术学院,西安,710049;军事医学科学院卫生学环境医学研究所,天津,300050;西安工程大学环境与化学工程学院,西安,710048
2. 军事医学科学院卫生学环境医学研究所,天津,300050
3. 西安交通大学生命科学与技术学院,西安,710049
摘    要:构建了荧光实时定量PCR标准品以检测水中的铜绿假单胞菌.利用所报道的铜绿假单胞菌gyrA基因为目的基因设计引物,通过培养细胞,煮沸法裂解细胞后做PCR,电泳,胶回收,然后与pMD19-T Vector连接并转化到感受态大肠杆菌中;氨苄青霉素筛选出白色菌落,菌落PCR及测序鉴定其特异性,根据OD值确定浓度,制备梯度浓度参考标准品,制作标准曲线,检测水样品中铜绿假单胞菌的菌量.

关 键 词:铜绿假单胞菌  克隆  标准品  荧光实时定量PCR  检测

Construction of Reference Standards for Detecting Pseudomonas aeruginosa with Fluorescence Real-time Quantitative PCR
Sun Feilong,Qiu Zhigang,Jin Min,Guo Xiangfei,Wang Xinwei,Wu Daocheng,Li Junwen.Construction of Reference Standards for Detecting Pseudomonas aeruginosa with Fluorescence Real-time Quantitative PCR[J].Biotechnology Bulletin,2009(10).
Authors:Sun Feilong  Qiu Zhigang  Jin Min  Guo Xiangfei  Wang Xinwei  Wu Daocheng  Li Junwen
Abstract:
Keywords:
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