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细粒棘球蚴eg95基因的克隆以及原核融合表达
引用本文:贾如,邹媛媛,李轶女,魏兆军,沈桂芳.细粒棘球蚴eg95基因的克隆以及原核融合表达[J].生物技术通报,2008(5).
作者姓名:贾如  邹媛媛  李轶女  魏兆军  沈桂芳
作者单位:1. 合肥工业大学生物与食品工程学院,合肥,230009
2. 中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081
摘    要:从青海省羊源细粒棘球蚴提取基因组DNA,PCR扩增eg95基因并且克隆。测序结果表明该基因序列全长1262bp,由2个内含子和3个外显子组成,3个外显子分别为70bp、306bp和95bp。因此,推测其ORF为471bp,编码156个氨基酸。用RT—PCK方法扩增该基因的ORF,经克隆、DNAstar比对分析序列,它与预测的ORF序列100%相同。将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-5x-1,构建重组表达质粒pGEX-5x-1-eg95,将其转入表达菌株BL21中进行原核表达。表达产物经过SDS—PAGE电泳分析,得到一条特异的蛋白条带;质谱鉴定证明表达的蛋白确实是eg95抗原蛋白;酶联接免疫吸附剂测定表明抗原抗体发生了特异性反应,进一步证明融合蛋白进行了正确表达,从而为囊型包虫病的研究奠定基础。

关 键 词:细粒棘球蚴  原核表达  酶联接免疫吸附剂测定

Clone and Prokaryotic Fused Expression of Echinococcus granulosus 95 Gene
Jia Ru,Zou Yuanyuan,Li Yinv,Wei Zhaojun,Shen Guifang.Clone and Prokaryotic Fused Expression of Echinococcus granulosus 95 Gene[J].Biotechnology Bulletin,2008(5).
Authors:Jia Ru  Zou Yuanyuan  Li Yinv  Wei Zhaojun  Shen Guifang
Abstract:
Keywords:
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