| 牙鲆碱性磷酸酶基因5＇调控区的克隆及其功能检测 |
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| 引用本文： | 施志仪,顾一峰,陈晓武,胡燕林.牙鲆碱性磷酸酶基因5＇调控区的克隆及其功能检测[J].生物技术通报,2008(2):207-213. |
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| 作者姓名： | 施志仪 顾一峰 陈晓武 胡燕林 |
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| 作者单位： | 上海水产大学生物技术研究中心,上海200090 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No.30571420),国家教育部博士基金项目(No.20040264001),上海市教委重点科研项目资助(No.052252) |
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| 摘 要： | 通过基因组步移的方法扩增出一段924bp的牙鲆碱性磷酸酶基因5＇调控区序列，在线软件分析表明5＇调控区内可能含有GKLF、Oct、CREB、E2F、CEBP、GATA-1、Pitx-1、Pit1、RARE／TRE、AP4等转录因子结合位点。采用DNA重组的方法，将克隆得到的5＇调控区片段插入启动子缺失的增强型绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-1中，构建重组表达载体pEGFP-JFALP。重组载体瞬时转染COS-7细胞，在倒置荧光显微镜下可以检测到绿色荧光信号，且荧光信号随着时间的延长而增强。结果表明本实验克隆的牙鲆碱性磷酸酶基因5＇调控区具有一定的启动子活性，为今后进一步研究碱性磷酸酶基因表达调控的分子机制奠定基础。
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| 关 键 词： | 碱性磷酸酶 基因 5＇调控区 克隆 功能 |
| 修稿时间： | 2007年10月16 |
Cloning and Function Detection of 5'Regulation Region of Alkaline Phosphatase from Japanese Flounder(Paralichthys olivaceus) |
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