p53基因敲除大鼠模型的构建及表型分析 |
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引用本文: | 霍桂桃,杨艳伟,吴曦,刘甦苏,李芊芊,周舒雅,柳全明,王三龙,沈月雷,吕建军,范昌发.p53基因敲除大鼠模型的构建及表型分析[J].生物技术通报,2018(8). |
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作者姓名: | 霍桂桃 杨艳伟 吴曦 刘甦苏 李芊芊 周舒雅 柳全明 王三龙 沈月雷 吕建军 范昌发 |
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作者单位: | 中国食品药品检定研究院国家药物安全评价监测中心药物非临床安全评价研究北京市重点实验室;中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所模式动物研究室;百奥赛图基因生物技术有限公司 |
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摘 要: | 使用TALEN技术制作p53基因敲除大鼠模型,建立种群并分析大鼠表型。设计特异性识别p53基因外显子2的TALEN蛋白并构建相应载体,将体外转录的TALEN m RNA注射SD大鼠受精卵,出生后从仔鼠中通过测序筛选靶位点正确剪切的阳性小鼠。结果显示,注射得到11只新生仔鼠,通过测序发现其中有10只靶位点发生剪切。选取其中4只作为首建鼠进行繁殖。p53基因敲除纯合子表现出肿瘤易发性,主要自发性肿瘤类型为恶性纤维组织肉瘤。此外,p53基因敲除纯合子大鼠表现出眼睛发育异常,视网膜变性及晶状体纤维排列紊乱。通过TALEN技术高效地获得了p53基因敲除大鼠模型,纯合子敲除大鼠除了易发肿瘤并伴有眼发育异常,因而该敲除大鼠模型除了可用于研究肿瘤发生机制外,也可用于研究p53基因在眼发育过程中的功能。
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