| 耐热DNA聚合酶基因双元载体的初步构建 |
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| 引用本文： | 梁雪莲,关彩蝶,柳勇,廖伯强.耐热DNA聚合酶基因双元载体的初步构建[J].生物技术通报,2009(10). |
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| 作者姓名： | 梁雪莲 关彩蝶 柳勇 廖伯强 |
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| 作者单位： | 仲恺农业工程学院生命科学院,广州,510225 |
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| 基金项目： | 广东省科技厅"甜糯玉米耐热DNA聚合酶基因的转化与耐热品系选育" |
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| 摘 要： | Taq DNA聚合酶是PCR反应中的重要试剂,它具有结构性稳定和耐高温的特性,有能在90℃以上合成DNA的能力,因此被广泛使用于DNA扩增技术当中,但是国内尚未报道有关Taq DNA聚合酶基因用于转基因的研究.若将此耐热基因转入某些经济作物中培育耐热新品种,将会有很好的前景和实用价值.本试验将初步构建Taq DNA聚合酶的基因表达双元载体.通过引物设计,用PCR法从含有Thermus aquaticus DNA polymerase克隆基因的散装Taq DNA 聚合酶中扩增耐热DNA 聚合酶基因,得到约2.5 kb的DNA片段.扩增片段连接到质粒pUC19中测序证实是Taq DNA聚合酶基因,再将该片段重组到双元载体pBin19中,通过蓝白筛选选择重组子,构建耐热DNA聚合酶的基因双元载体pBin19-Taq.对其作进一步的加工,即插入植物启动子和增强子等后,可通过土壤农癌杆菌的介导作用,用作植物转基因之用.
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| 关 键 词： | DNA聚合酶 双元载体 蓝白筛选 |
The Establish of Expression Vector of the Mostable DNA Polymerase Gene |
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| Liang Xuelian,Guan Caidie,Liu Yong,Liao Boqiang.The Establish of Expression Vector of the Mostable DNA Polymerase Gene[J].Biotechnology Bulletin,2009(10). |
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| Authors: | Liang Xuelian Guan Caidie Liu Yong Liao Boqiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PCR Taq |
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