一种新的植物miRNA体内下调表达系统 |
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引用本文: | 姜锋,许硕,胡正,姜奇彦,张辉.一种新的植物miRNA体内下调表达系统[J].生物技术通报,2014(9). |
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作者姓名: | 姜锋 许硕 胡正 姜奇彦 张辉 |
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作者单位: | 中国农业科学院作物科学研究所; |
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基金项目: | 中国农业科学院创新项目(ASTIP)(2014ZX08011-003) |
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摘 要: | MicroRNA(miRNA)是一种内源性的21到24个核苷酸长度的小分子RNA,在植物发育过程中起重要作用。旨在建立一种新的植物miRNA下调表达系统,为miRNA的功能研究提供有力的工具。不同于原有target mimicry的构建方法,以miRNA核心序列为基础,通过设计特定DNA引物,利用聚合酶链式反应(PCR)获得多拷贝的靶基因类似序列(Target mimicry or target mimics),构建target mimicry载体,转化拟南芥。通过qRT-PCR验证miRNA靶基因在转基因植株中的表达。以拟南芥6个保守miRNA为基础,获得了各个miRNA下调表达转基因株系,在转基因植株中检测miRNA靶基因的表达,与野生型相比差异明显,均发生了明显的上调。我们基于一种新的target mimicry的载体构建方法,成功建立了一种在植物中具有普遍适用性的高效miRNA低表达系统。
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关 键 词: | miRNA 低表达 植物 新方法 |
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