蛋白A-葡聚糖-Fe_3O_4纳米磁珠的制备及对IgG分离纯化 |
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引用本文: | 任敬钢,程超,仲从浩,张丽,李荣秀.蛋白A-葡聚糖-Fe_3O_4纳米磁珠的制备及对IgG分离纯化[J].生物技术通报,2014(7). |
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作者姓名: | 任敬钢 程超 仲从浩 张丽 李荣秀 |
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作者单位: | 上海交通大学微生物代谢国家重点实验室;上海交通大学生命科学技术学院; |
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基金项目: | 国家科技重大专项(重大新药创制专项)(2014ZX09101043) |
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摘 要: | 蛋白A(Staphylococcal Protein A,简称蛋白A或SPA)是对IgG有特异性吸附能力的生物配基,将其偶联到葡聚糖修饰的Fe3O4纳米磁珠上,研究SPA纳米磁珠对IgG的纯化能力。采用高温多元醇法合成不同粒径的纳米磁珠,研究磁珠粒径对IgG吸附量的影响,并对磁珠静态载量、吸附时间、可重复性进行研究,为工业化应用提供理论依据。通过控制反应体系中NaOH的浓度成功地合成了平均粒径从30 nm到200 nm的Fe3O4纳米磁珠,通过吸附量试验证明了磁珠粒径对IgG吸附量有较大影响,当磁珠平均粒径在101.5 nm时对IgG的吸附量最大,静态吸附载量为84.85 mg/mL,亲和常数为3.48×106 M-1。对磁珠进行5次循环再生试验后,磁珠的吸附性能没有明显的降低。利用磁珠能高效快速地从人血清中纯化到IgG,纯度达到93.5%(SDS-PAGE),回收率为88.7%。因此,这种磁性分离基质在IgG纯化中有较大的应用潜力,
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关 键 词: | 葡聚糖 纳米磁珠 蛋白AIgG纯化 |
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