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| 靶向HBs基因的shRNA表达载体的构建及其抑制HepG2.2.15表达HBVsAg的作用 | |
| 引用本文： | 杨尚君,王亚平,唐恩洁,张国元.靶向HBs基因的shRNA表达载体的构建及其抑制HepG2.2.15表达HBVsAg的作用[J].生物技术通报,2009(11). |
| 作者姓名： | 杨尚君 王亚平 唐恩洁 张国元 |
| 作者单位： | 1. 重庆医科大学基础医学院组织与胚胎学教研室,重庆,400016;川北医学院免疫与分子生物研究所,南充,637000 2. 重庆医科大学基础医学院组织与胚胎学教研室,重庆,400016 3. 川北医学院免疫与分子生物研究所,南充,637000 4. 川北医学院附属医院检验科,南充,637000 |
| 摘 要： | 探索用PGenesil-1(Pg)构建的靶向乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因的shRNA表达载体PGenesil-1-HBs(简称Pgs),对体外培养HepG2.2.15细胞中的HBV基因及其抗原表达的抑制作用.设计、合成靶向HBV S区的3对DNA序列,分别插入PGenesil-1中构建3个siRNA表达载体Pgs1、Pgs2、Pgs3,经限制性内切酶,DNA序列测定等技术鉴定确认.筛选并确定最佳细胞接种量及重组质粒转染量后,分别或按不同组合转染HepG-2.2.15细胞,48 h后采用半定量RT-PCR检测HBVsmRNA转录水平,免疫细胞化学技术检测HBsAg表达水平,MEIA分别检测细胞裂解液和培养上清中HBsAg和HBeAg的表达水平.结果表明,HBV真核表达载体Pgs1、Pgs2、Pgs3均能不同程度地抑制HepG2.2.15细胞中的HBsAg、HBeAg合成和HBs-mRNA转录.成功构建的HBV真核表达载体Pgs1、Pgs2、Pgs3,其中PgS3能显著抑制HBsAg表达(P＜0.01).多种表达载体联合对抗原表达的抑制作用效率不同. |
| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 小发夹结构RNA RNA干扰 乙型肝炎病毒表面抗原 |
Inhibition of HBV Surface Antigen Expression by shRNA Expressing Vector Targeting HBV S Gene in HepG2.2.15 Cells |
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| Yang Shangjun,Wang Yaping,Tang Enjie,Zhang Guoyuan.Inhibition of HBV Surface Antigen Expression by shRNA Expressing Vector Targeting HBV S Gene in HepG2.2.15 Cells[J].Biotechnology Bulletin,2009(11). | |
| Authors: | Yang Shangjun Wang Yaping Tang Enjie Zhang Guoyuan |
| Abstract: | |
| Keywords: | Hepatitis B Virus shRNA RNAi HBsAg |
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