大豆转录因子GmC2H2基因转化拟南芥效果分析 |
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引用本文: | 单曙光,于国红,徐娜,程宪国.大豆转录因子GmC2H2基因转化拟南芥效果分析[J].生物技术通报,2011(12). |
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作者姓名: | 单曙光 于国红 徐娜 程宪国 |
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作者单位: | 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 农业部植物营养与肥料重点实验室,北京,100081 |
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摘 要: | GmC2H2转录因子基因是本实验室获得的一个编码172个氨基酸携带516bp核苷酸的转录因子,属于经典C2H2型锌指蛋白.通过构建植物表达载体GmC2H2-pCAMBIA1304,借助优化的Floral-dip法转化模式植物拟南芥,经潮霉素Hygromycine( 45-50 mg/L)抗性筛选获得转基因拟南芥植株.GUS组织染色分析表明,GmC2H2基因在生长12d的转基因拟南芥幼苗中,表达部位主要集中在根部.对转基因拟南芥进行了低温(1℃)和脱落酸(200 μmol/L)胁迫处理,测定其生理生化指标,通过real-time qPCR确定目的基因在转基因拟南芥中的表达情况.结果表明,携带GmC2H2目的基因的转基因拟南芥中脯氨酸和可溶性糖水平要高于野生型植株,而丙二醛水平要低于野生型,在抗逆性方面明显优于野生型拟南芥植株;并且胁迫处理下的转基因拟南芥中GmC2H2基因的表达量要高于未胁迫处理的转基因植株,说明GmC2H2基因的表达受低温和ABA的诱导,初步明确了该转录因子基因的功能.
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关 键 词: | GmC2H2 锌指蛋白 转基因拟南芥 GUS检测 Real-time qPCR |
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