| 构建骨骼肌特异表达人FS基因载体及其稳定转染绵羊胎儿成纤维细胞 |
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| 引用本文： | 王玮,袁建龙,金永,朱兵,岳群华,梁浩,郭旭东,刘东军,仓明.构建骨骼肌特异表达人FS基因载体及其稳定转染绵羊胎儿成纤维细胞[J].生物技术通报,2011(11). |
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| 作者姓名： | 王玮 袁建龙 金永 朱兵 岳群华 梁浩 郭旭东 刘东军 仓明 |
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| 作者单位： | 内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室,呼和浩特,010021 |
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| 基金项目： | 国家“863”计划项目(2008AA101007); 内蒙古自治区自然科学基金重点项目(20080404Zd08) |
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| 摘 要： | 旨在构建骨骼肌特异表达人卵泡抑制素( follistatin,Fs)基因载体并得到其稳定转染的蒙古绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础.首先通过RT-PCR方法克隆得到人FS基因cDNA序列,然后与猪骨骼肌特异表达启动子α-actin以及红色荧光蛋白表达元件连接,构建成FS基因骨骼肌特异表达载体pCFCDS.脂质体介导外源表达载体转染绵羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选后得到稳定转染的绵羊转基因细胞克隆.PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合,分析转基因细胞系的核型和生长状况.结果显示,成功构建得到绵羊骨骼肌特异表达人FS基因的真核表达载体,并得到其稳定转染的转基因绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础.
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| 关 键 词： | 绵羊 卵泡抑制素 骨骼肌特异表达载体 转基因细胞系 |
Construction of a Skeletal Muscle Specific Expression Vector of Follistatin and Its Stable Transfection into Sheep Fetal Fibroblasts Cells |
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| Wang Wei,Yuan Jianlong,Jin Yong,Zhu Bing,Yue Qunhua,Liang Hao,Guo Xudong,Liu Dongjun,Cang Ming.Construction of a Skeletal Muscle Specific Expression Vector of Follistatin and Its Stable Transfection into Sheep Fetal Fibroblasts Cells[J].Biotechnology Bulletin,2011(11). |
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| Authors: | Wang Wei Yuan Jianlong Jin Yong Zhu Bing Yue Qunhua Liang Hao Guo Xudong Liu Dongjun Cang Ming |
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| Institution: | Wang Wei Yuan Jianlong Jin Yong Zhu Bing Yue Qunhua Liang Hao Guo Xudong Liu Dongjun Cang Ming(The Key Laboratory of Mammalian Reproductive Biology and Biotechnology of Ministry of Education of P.R.China,Inner Mongolia University,Hohhot 010021) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Sheep Follistatin(FS) Skeletal muscle specific expression vector Transgenic cell line |
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