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野生濒危植物掌叶木的ISSR-PCR反应体系的建立
引用本文:李雪萍,李在留,崔彬彬,贺春玲,彭健,杨婷,周振艳.野生濒危植物掌叶木的ISSR-PCR反应体系的建立[J].生物技术通报,2011(9).
作者姓名:李雪萍  李在留  崔彬彬  贺春玲  彭健  杨婷  周振艳
作者单位:1. 河南科技大学林学院,洛阳,471003
2. 广西大学林学院,南宁,530004
3. 保定学院生化系,保定,071000
基金项目:国家自然科学基金项目(31060053); 河南省自然科学基金项目(62580021); 广西自然科学基金项目(2011GXNSFB018016)
摘    要:以野生濒危植物掌叶木的叶片为材料,通过单因子试验分别研究了模板DNA、退火温度、TaqDNA聚合醇用量、dNTP浓度、Mg2+浓度、引物浓度等对ISSR-PCR反应的影响,找出各自的合适条件,通过各个因子的组合研究建立了适宜于掌叶木ISSR分析的扩增体系,即25μL的反应体系中含模板DNA约30ng,Mg2+2.0 mmool/L,引物0.8μmol/L,dNTP0.20 mmol/L,TaqDNA聚合酶1.5U.该研究为利用ISSR分析掌叶木遗传多样性、进行掌叶木种质资源研究等奠定了良好的基础.

关 键 词:掌叶木  ISSR  PCR  优化
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