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| 重金属锌单克隆抗体的制备及鉴定 | |
| 引用本文： | 赵丽,王凤龙,杨慧,李鹏,李霞.重金属锌单克隆抗体的制备及鉴定[J].生物技术通报,2011(7). |
| 作者姓名： | 赵丽 王凤龙 杨慧 李鹏 李霞 |
| 作者单位： | 1. 内蒙古农业大学动物科学与医学学院，呼和浩特010018;北京市农林科学院蔬菜研究中心,北京100097 2. 内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018 3. 北京市农林科学院蔬菜研究中心,北京,100097 4. 北京市农林科学院蔬菜研究中心,北京100097;北京农产品质量检测与农田环境监测技术研究中心，北京100097 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(“863”计划)，国家自然科学基金，北京市科委课题，北京市农林科学院科技创新能力建设专项 |
| 摘 要： | 通过双功能螯合剂S-20-(4-异硫氰苄基)-二乙烯三胺五乙酸(p-SCN-Bn-DTPA)将锌离子(Zn2+)分别与载体蛋白匙孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)和牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)偶联.通过二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)法测抗原蛋白浓度,对抗原、KLH和BSA分别进行紫外分光光度计扫描,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)进行定性鉴定,利用石墨炉原子吸收分光光度法检测抗原中Zn2+含量等,成功获得了免疫抗原Zn-DTPA-KLH和检测抗原Zn-DTPA-BSA、DTPA-BSA.用Zn-DTPA-KLH免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合,极限稀释法亚克隆,间接酶联免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)筛选,获得了1株稳定分泌抗重金属锌抗体的杂交瘤细胞株(Z1A5).Z1A5染色体数目在100以上,所分泌的抗体为IgM亚类,轻链为kappa型,腹水型抗体效价高达1∶51 200.本研究为锌离子残留免疫学检测方法的建立提供了物质及技术基础,对提高风险评估工作的效率和质量,保障食品安全有重要现实意义. |
| 关 键 词： | 重金属 锌 螯合抗原 单克隆抗体 间接酶联免疫吸附法 |
Preparation and Characterization of Specific Monoclonal Antibodies Against Zinc |
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| Zhao Li,Wang Fenglong,Yang Hui,Li Peng,Li Xia.Preparation and Characterization of Specific Monoclonal Antibodies Against Zinc[J].Biotechnology Bulletin,2011(7). | |
| Authors: | Zhao Li Wang Fenglong Yang Hui Li Peng Li Xia |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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