| 表达重组咖啡豆α-半乳糖苷酶的酵母工程菌的高密度发酵 |
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| 引用本文： | 高红伟,贾延军,鲍国强,季守平,檀英霞,李素波,章扬培,宫锋.表达重组咖啡豆α-半乳糖苷酶的酵母工程菌的高密度发酵[J].生物技术通报,2009(11). |
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| 作者姓名： | 高红伟 贾延军 鲍国强 季守平 檀英霞 李素波 章扬培 宫锋 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院野战输血研究所,北京,100850 |
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| 摘 要： | 用5 L发酵罐优化了重组咖啡豆α-半乳糖苷酶酵母工程菌pPIC9K-Gal/GS115(本室构建)的高密度发酵工艺.通过对发酵条件的优化,包括甘油补充量及补充时机、甲醇诱导量及诱导时机、溶氧控制、诱导时间等,重组咖啡豆α-半乳糖苷酶在毕赤酵母中得到了高效表达.利用所确定的最适条件进行发酵,菌体密度最终达到368 g/L以上,每批发酵液离心后可获得3.5 L的发酵上清,上清中的蛋白含量达到3 g/L以上,目的蛋白占上清总蛋白的50%以上,含量约为1.5 g/L,上清中α-半乳糖苷酶的活性维持在80 U/ml左右.确立工艺后又进行了3次发酵试验,证明了工艺的可行性和稳定性.为重组咖啡豆α-半乳糖苷酶在B→O血型改造和酶解大豆低聚糖方面的应用奠定了基础.
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| 关 键 词： | α-半乳糖苷酶 毕赤酵母 高密度培养 |
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