| 核酸疫苗pcDNA3.1-EG95的构建及在绵羊胎儿成纤维细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 杨娇馥,王志钢,高连山,郝慧芳,李志伟,李洁,湛奎.核酸疫苗pcDNA3.1-EG95的构建及在绵羊胎儿成纤维细胞中的表达[J].生物技术通报,2010(11). |
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| 作者姓名： | 杨娇馥 王志钢 高连山 郝慧芳 李志伟 李洁 湛奎 |
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| 作者单位： | 1. 内蒙古大学生命科学学院,哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室,呼和浩特,010021
2. 鄂尔多斯职业学院,鄂尔多斯,017200 |
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| 基金项目： | 国家基础科学人才培养基金项目 |
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| 摘 要： | 克隆细粒棘球蚴EG95基因cDNA并构建核酸疫苗pcDNA3.1-EG95。根据GenBank中细粒棘球蚴EG95基因序列(AF134378)设计引物并在上游引物起始密码子前加上Kozak序列(CCACC),提取细粒棘球蚴总RNA,RT-PCR扩增目的基因EG95cDNA,扩增片段克隆到pcDNA3.1(+)中构建重组载体pcDNA3.1-EG95后测序。重组质粒pcDNA3.1-EG95采用脂质体法转染绵羊胎儿成纤维细胞并用G418筛选,RT-PCR检测稳定转染细胞中目的基因的转录。测序结果表明克隆的目的基因包含了471bp的完整ORF并与载体连接正确。RT-PCR检测表明EG95基因在稳定转染的绵羊胎儿成纤维细胞中得到转录。成功构建pcDNA3.1-EG95核酸疫苗并可在绵羊胎儿成纤维细胞中转录目的基因,可进一步用于活体动物免疫研究。
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| 关 键 词： | 细粒棘球蚴 EG95基因 核酸疫苗 |
Construction of Nucleic Acid Vaccine of EG95 and Expression in Sheep Fetal Fibroblasts |
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| Yang Jiaofu,Wang Zhigang,Gao Lianshan,Hao Huifang,Li Zhiwei,Li Jie,Zhan Kui.Construction of Nucleic Acid Vaccine of EG95 and Expression in Sheep Fetal Fibroblasts[J].Biotechnology Bulletin,2010(11). |
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| Authors: | Yang Jiaofu Wang Zhigang Gao Lianshan Hao Huifang Li Zhiwei Li Jie Zhan Kui |
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