| 畜禽养殖粪污中典型致病菌的三重微滴式数字PCR定量检测方法的建立北大核心CSCD |
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| 引用本文： | 程深伟,张克强,梁军锋,刘福元,郜兴亮,杜连柱.畜禽养殖粪污中典型致病菌的三重微滴式数字PCR定量检测方法的建立北大核心CSCD[J].生物技术通报,2022(9):271-280. |
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| 作者姓名： | 程深伟 张克强 梁军锋 刘福元 郜兴亮 杜连柱 |
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| 作者单位： | 1.农业农村部环境保护科研监测所300191;2.新疆农垦科学院畜牧兽医研究所832000; |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划(2016YFD0501407)。 |
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| 摘 要： | 为精准、快速检测畜禽养殖粪污中典型致病微生物,减少人畜共患病的传播风险,以金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌(O157:H7)和肠炎沙门氏菌3种常见致病菌为研究对象,通过筛选其特异性引物与探针、优化反应系统,建立起快速、稳定的多重微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)反应体系。通过检测不同菌株验证该体系的特异性,并确定畜禽养殖废弃物致病菌的检出限,开发出多重微滴数字PCR快速检测方法。研究结果表明,各对引物探针对目标菌株均能扩增,ddPCR体系内未出现交叉反应,检测肠炎沙门氏菌的绝对定量检测低限为0.68 copies/μL;检测金黄色葡萄球菌的绝对定量检测低限为0.79 copies/μL;检测大肠埃希氏菌的绝对定量检测低限为1.02 copies/μL。研究建立的方法可实现对畜禽养殖粪污中3种典型致病菌的高效率、高精度的检测。
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| 关 键 词： | 养殖粪污 沙门氏菌 大肠埃希氏菌 金黄色葡萄球菌 三重微滴式数字PCR |
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