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p53基因表达沉默的稳定Vero细胞系的建立及特性分析
引用本文:刘超,邱亚峰,沈阳,刘庆伟,马志永.p53基因表达沉默的稳定Vero细胞系的建立及特性分析[J].生物技术通报,2010(7).
作者姓名:刘超  邱亚峰  沈阳  刘庆伟  马志永
作者单位:中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生研究室,上海,200241
基金项目:国家自然科学基金青年基金,中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目 
摘    要:利用慢病毒介导的RNA干扰技术,建立稳定沉默p53基因的Vero细胞模型。设计针对p53基因的shRNA序列,构建p53shRNA慢病毒载体并感染Vero细胞;嘌呤霉素筛选阳性细胞,局部消化法挑选细胞克隆;利用RT-PCR和West-ernblot检测p53的表达水平;利用虫荧光素酶报告系统,分析p53的转录激活功能。RT-PCR和Westernblot结果显示,慢病毒介导的shRNA有效地沉默p53基因表达;与对照组细胞相比,干扰组细胞的p53的转录激活功能明显降低。慢病毒介导的shRNA高效、稳定地沉默了p53基因的表达,同时,有效地降低了p53的转录激活功能,为研究p53的生物学功能提供了有利的工具。

关 键 词:慢病毒载体  RNA干扰  筛选  细胞系

Generation and Characteristic Analysis of a Stable Vero Cell Line with p53 Gene Expression Knocked-down Using Lentiviral Vector-mediated Short Hairpin RNA
Liu Chao,Qiu Yafeng,Shen Yang,Liu Qingwei,Ma Zhiyong.Generation and Characteristic Analysis of a Stable Vero Cell Line with p53 Gene Expression Knocked-down Using Lentiviral Vector-mediated Short Hairpin RNA[J].Biotechnology Bulletin,2010(7).
Authors:Liu Chao  Qiu Yafeng  Shen Yang  Liu Qingwei  Ma Zhiyong
Abstract:
Keywords:p53
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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