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变性高效液相色谱检测沙门氏菌、空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌
引用本文:徐君怡,曹际娟,郑秋月,刘淑艳,徐杨.变性高效液相色谱检测沙门氏菌、空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌[J].生物技术通报,2009(3).
作者姓名:徐君怡  曹际娟  郑秋月  刘淑艳  徐杨
作者单位:辽宁出入境检验检疫局,大连,116015
摘    要:应用多重PCR 反应(multiplex PCR,mPCR)结合变性高效液相色谱(denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)技术建立食品中沙门氏菌、空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌O157:H7的快速检测方法.以编码沙门氏菌的fimY基因、编码空肠弯曲菌的gyrA基因和编码肠出血性大肠杆菌O157:H7的rfbE基因为靶基因,选择3对引物,建立并优化了快速鉴别沙门氏菌、空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌O157:H7的多重PCR体系,扩增产物分别为284、159和499 bp,并验证了该多重PCR具有特异性.沙门氏菌、空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌O157:H7标准菌株稀释成不同梯度,做灵敏度检测.试验结果表明该方法有很好的特异性,且灵敏度高,检测限可达到:沙门氏菌1.5 CFU/ml、空肠弯曲菌15 CFU/ml、肠出血性大肠杆菌O157:H7 15 CFU/ml.在随机采集的226份冷冻鸡肉类样品中,检出了7份样品为沙门氏菌阳性、10份为空肠弯曲菌阳性、1份为肠出血性大肠杆菌O157:H7阳性.研究建立的多重PCR-DHPLC方法可特异、灵敏地实现对沙门氏菌、空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌O157:H7的快速检测.

关 键 词:沙门氏菌  空肠弯曲菌  肠出血性大肠杆菌O157  变性高效液相色谱

Identification of Salmonella,Campylobacter jejuni and Enterohemorrhagic E.coli by Denaturing High-performance Liquid Chromatography
Xu Junyi,Cao Jijuan,Zheng Qiuyue,Liu Shuyan,Xu Yang.Identification of Salmonella,Campylobacter jejuni and Enterohemorrhagic E.coli by Denaturing High-performance Liquid Chromatography[J].Biotechnology Bulletin,2009(3).
Authors:Xu Junyi  Cao Jijuan  Zheng Qiuyue  Liu Shuyan  Xu Yang
Abstract:
Keywords:H7
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