| 华根霉前导肽和成熟肽脂肪酶基因的克隆表达及性质研究 |
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| 引用本文： | 李飏,王栋,徐岩.华根霉前导肽和成熟肽脂肪酶基因的克隆表达及性质研究[J].生物技术通报,2009(2). |
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| 作者姓名： | 李飏 王栋 徐岩 |
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| 作者单位： | 江南大学生物工程学院,教育部工业生物技术重点实验室,无锡,214122 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，江苏省自然科学基金，江苏省高技术研究计划 |
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| 摘 要： | 以华根霉(Rhizopus chinensis CCTCCM201021)为出发菌株,提取总DNA,PCR扩增出前导肽脂肪酶基因(proRCL)及成熟肽脂肪酶基因(mRCL),克隆到原核载体pET-28a,转化E-coli BL21(DE3),诱导表达并纯化出活性目的蛋白.经SDS-PAGE分析,重组蛋白ProRCL和MRCL的分子量分别约43 kD和33 kD.两重组脂肪酶主要酶学性质基本相似,最适反应温度均为35℃,40℃下较为稳定;最适反应pH相近,分别为8.0和8.5;以pNP脂肪酸酯为底物,均对短链脂肪酸酯底物特异性较高.MPCL上述性质与野生型RCL基本一致.研究结果表明,通过条件控制可以利用E.coli表达系统表达具有活性的华根霉前导肽脂肪酶ProRCL和成熟肽脂肪酶MRCL.与米根霉脂肪酶(ROL)不同,前导序列对华根霉脂肪酶的主要酶学特性没有显著影响.
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| 关 键 词： | 华根霉 前导肽脂肪酶 成熟肽脂肪酶 克隆 表达 性质 |
Expression of the Gene of Pro-and Mature Rhizopus chinensis Lipases and Associated Characteristics |
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| Li Yang,Wang Dong,Xu Yan.Expression of the Gene of Pro-and Mature Rhizopus chinensis Lipases and Associated Characteristics[J].Biotechnology Bulletin,2009(2). |
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| Authors: | Li Yang Wang Dong Xu Yan |
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