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稻香相关基因OsBADH2在“吉粳88”中的基因编辑研究
引用本文:周岩,郭嘉,胡玉锋,魏健,李毅丹.稻香相关基因OsBADH2在“吉粳88”中的基因编辑研究[J].生物技术通报,2020(3):88-94.
作者姓名:周岩  郭嘉  胡玉锋  魏健  李毅丹
作者单位:长春师范大学生命科学学院;吉林省农业科学院农业生物技术研究所;吉林省农业生物技术重点实验室吉林省农业科学院;吉林师范大学生命科学学院
基金项目:吉林省科技发展计划项目(20170101014);吉林省农业创新工程项目(CXGC-2017TD004,C92070502)
摘    要:近年来稻米的香味品质受到消费市场的格外重视。水稻OsBADH2基因是影响稻米香味的重要基因,选择优质粳稻品种,针对该基因进行基因编辑,有望创制出香味品质优异的粳稻材料。本研究通过分析OsBADH2基因外显子序列的保守性,选择了3个特异性靶点,分别构建了U6启动子驱动的包含不同靶点的gRNA表达盒,并将其连入植物基因编辑表达载体。利用基因枪介导的瞬时转化体系,对非香型粳稻品种"吉粳88"进行遗传转化,T_0代共获得847株再生材料。经高分辨率溶解曲线(High Resolution Melting,HRM)分析和测序验证,24株T_0代材料的OsBADH2基因编辑靶点发生了不同类型的编辑。在T_1代材料中获得了7类不含转基因成分,且OsBADH2基因靶点纯合的基因编辑后代材料。本研究结果表明基于基因枪介导的瞬时转化体系,转化再生过程中省略了抗性筛选过程,并辅以高效的HRM检测,能够在T_1代即获得位点发生纯合编辑且无转基因成分的基因编辑后代材料。本研究获得的OsBADH2基因编辑的"吉粳88"后代材料也为培育香味品质改良的粳稻品种提供了新材料。

关 键 词:基因组编辑  高分辨率溶解曲线  OsBADH2  水稻
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