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| 蓖麻和线虫的两种不同结构脂肪酸去饱和酶的原核表达 | |
| 引用本文： | 元冬娟,吴湃,熊继红,周克元,江黎明.蓖麻和线虫的两种不同结构脂肪酸去饱和酶的原核表达[J].生物技术通报,2008(Z1). |
| 作者姓名： | 元冬娟 吴湃 熊继红 周克元 江黎明 |
| 作者单位： | 1. 广东医学院基因营养健康研究中心,湛江,524023 2. 广东医学院生物化学与分子生物学教研室,湛江,524023 3. 广东医学院基因营养健康研究中心,湛江524023;广东医学院生物化学与分子生物学教研室,湛江,524023 |
| 基金项目： | 广东省科技计划项目(2005B10401011);;广东省自然科学基金(5011595) |
| 摘 要： | 目的:通过在原核表达系统中表达蓖麻的可溶性脂肪酸去饱和酶基因和线虫的fat-1脂肪酸去饱和酶基因,为脂肪酸去饱和酶序列结构与功能的研究奠定基础。方法:将蓖麻RCD△9脂肪酸去饱和酶和线虫fat-1脂肪酸去饱和酶基因亚克隆到大肠杆菌BL21表达载体pET32a+中,获得重组表达载体pET32a+-R9,pET32a+- F1,并通过SDS-PAGE和Western Blotting鉴定蛋白的表达情况。结果:经PCR和测序鉴定,证实两个重组质粒含有目的基因片段;SDS-PAGE和Western Blotting证实两种蛋白在大肠杆菌中获得表达,但表达量具有明显的不同;Anthepro软件对蛋白跨膜结构的分析,验证蓖麻△9脂肪酸去饱和酶和线虫fat-1脂肪酸去饱和酶在结构上的不同。结论:蓖麻的RCD脂肪酸去饱和酶和线虫的fat-1脂肪酸去饱和酶都得到了表达,但线虫fat-1脂肪酸去饱和酶表达量偏低;这可能与fat-1脂肪酸去饱和酶是一类跨膜蛋白的性质直接相关。因此,对于线虫fat-1脂肪酸去饱和酶的基于蛋白纯化的结构分析有待进一步的研究。 |
| 关 键 词： | 蓖麻△9脂肪酸去饱和酶 线虫fat-1脂肪酸去饱和酶 原核表达 |
Prokaryotic Expression of two Difierent Structure of Fatty Acid Desaturase from R.communis and C.elegan |
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| Yuan Dongjuan,Wu Pai,Xiong Jihong,Zhou Keyuan,Jiang Liming.Prokaryotic Expression of two Difierent Structure of Fatty Acid Desaturase from R.communis and C.elegan[J].Biotechnology Bulletin,2008(Z1). | |
| Authors: | Yuan Dongjuan Wu Pai Xiong Jihong Zhou Keyuan Jiang Liming |
| Institution: | 1;2;1 Sino-US Gene;Nutrition;Health Research Center Guangdong medical college;Zhenjiang 524023;2 Department of Biochemistry and Molecular Biology;Guangdong Medical College;Zhanjiang 524023 |
| Abstract: | Objective,To research on the structure and function of fatty acid desaturase,soluble fatty acid desaturase from R.communis and C.elegan were expressed in Prokaryotic expression system.Methods:Two target fragments were inserted into plasmid pET32a+and got recombinant plasmids pET32a+-R9,pET32a+-F1,then protein expression were analyzed by SDS-PAGE and Western Blotting.Results:Two recombinant plasmids were successfully constructed and identified by PCR and sequencing;SDS-PAGE and Western Blotting results showe... |
| Keywords: | |
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