| 四倍体刺槐枝条韧皮部总蛋白质双向电泳体系建立及应用 |
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| 引用本文： | 张胜,赵忠,刘昭军,张博勇,宗建伟,张玲玲.四倍体刺槐枝条韧皮部总蛋白质双向电泳体系建立及应用[J].生物技术通报,2013(1):116-122. |
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| 作者姓名： | 张胜 赵忠 刘昭军 张博勇 宗建伟 张玲玲 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学林学院;西北农林科技大学西部环境与生态教育部重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30972352) |
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| 摘 要： | 采用TCA/丙酮法对四倍体刺槐枝段韧皮部全蛋白质进行提取,通过对IPG胶条pH梯度、分离胶浓度的选择,上样量、等电聚焦条件的优化,建立起四倍体刺槐枝段韧皮部蛋白质双向电泳体系。研究结果表明:采用TCA/丙酮法提取四倍体刺槐枝段韧皮部全蛋白质,选用pH4-7的17 cm IPG胶条,考马斯亮蓝染色上样量550μg,等电聚焦IEF聚焦总伏小时数从60 000 Vh提高到80 000 Vh,并采用12%的分离胶对四倍体刺槐枝段韧皮部全蛋白进行双向电泳,能得到背景清晰、蛋白质点数相对较多,分离度高且重复性好的电泳图谱。利用建立的体系进行双向电泳分离蛋白质,能直接挖点送质谱分析。采用该体系分析四倍体刺槐硬枝扦插生根愈伤组织阶段蛋白质表达差异,共筛选出83个差异蛋白质点,其中上调蛋白15个,新产生蛋白22个,下调蛋白22个,缺失表达24个。
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| 关 键 词： | 四倍体刺槐 韧皮部 双向电泳 优化方法 差异蛋白质分析 |
Establishment and Application of Two-dimensional Gel Electrophoresis for Proteome from the Phloem of Tetraploid Robinia pseudoacacia |
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| Zhang Sheng,Zhao Zhong,Liu Zhaojun,Zhang Boyong,Zong Jianwei,Zhang Lingling.Establishment and Application of Two-dimensional Gel Electrophoresis for Proteome from the Phloem of Tetraploid Robinia pseudoacacia[J].Biotechnology Bulletin,2013(1):116-122. |
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| Authors: | Zhang Sheng Zhao Zhong Liu Zhaojun Zhang Boyong Zong Jianwei Zhang Lingling |
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| Institution: | 1(1.College of Forestry,Northwest A & F University,Yangling 712100;2.Ministry of Education Key Laboratory of Environment and Ecology in Western China,Northwest A & F University,Yangling 712100) |
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