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丙酮丁醇梭菌ldhL基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
引用本文:于振海,杨登峰,郭媛,马潘蕾,韦宇托,黄日波.丙酮丁醇梭菌ldhL基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J].生物技术通报,2010(3).
作者姓名:于振海  杨登峰  郭媛  马潘蕾  韦宇托  黄日波
作者单位:1. 广西大学生命科学与技术学院,南宁,530005
2. 广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心,南宁,530004
3. 广西大学生命科学与技术学院,南宁,530005;广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心,南宁,530004
基金项目:广西青年基金,广西亚热带生物资源保护利用重点实验室--省部共建国家重点实验室培育基地开放课题 
摘    要:首次从丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutylicum ATCC824)中克隆得到L-乳酸脱氢酶(L-lactate dehydrogenase,ldhL)基因,并将其连接到pSE380表达载体上,得到重组质粒pSE380ldhL,将重组质粒转化到乳酸脱氢酶和丙酮酸裂解酶缺陷的Escherichia coli FMJl44大肠杆菌中进行表达。SDS-PAGE分析表达产物的分子量约为34kD,摇瓶发酵后用HPLC检测分析L-乳酸产量为2.4g/L,纯度达到99.9%,不需要再进行手性分离,为以后在工业上生物法生产高纯度的L-乳酸打下基础。

关 键 词:L-乳酸  L-乳酸脱氢酶  克隆  表达

Cloning and Expression of ldhL Gene from Clostridium Acetobutylicum in Escherichia coli
Yu Zhenhai,Yang Dengfeng,Guo Yuan,Ma Panlei,Wei Yutuo,Huang Ribo.Cloning and Expression of ldhL Gene from Clostridium Acetobutylicum in Escherichia coli[J].Biotechnology Bulletin,2010(3).
Authors:Yu Zhenhai  Yang Dengfeng  Guo Yuan  Ma Panlei  Wei Yutuo  Huang Ribo
Institution:Yu Zhenhai1 Yang Dengfeng2 Guo Yuan1 Ma Panlei1 Wei Yutuo1 Huang Ribo1,2(1College of Life Science , Technology,Guangxi University,Nanjing 530005,2National Engineering Research Center for Non-food Biorefinery,Guangxi Academy of Sciences,Nanning 53004)
Abstract:The L-lactate dehydrogenase gene was firstly cloned from Clostridium acetobutylicum ATCC 824.The recombinant plasmid pSE380ldhL was constructed by inserting ldhL into expression vector pSE380 and then transformed into Escherichia coli FMJl44.SDS-PAGE result showed that the relative molecular weight of the expression product was about 34 kD.The production of L-Lactic acid analyzed by HPLC was about 2.4 g/L after fermentation in the flask.The degree of purity was 99.9%,which does not require Chiral separation...
Keywords:L-Lactic  acid L-lactate dehydrogenase  Cloning  Expression
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