| 柔嫩艾美耳球虫新基因的生物信息学分析与克隆表达 |
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| 引用本文： | 姜连连,林矫矫,韩红玉,董辉,赵其平,朱顺海,马卫娇,程军,曾艳波,黄兵.柔嫩艾美耳球虫新基因的生物信息学分析与克隆表达[J].生物技术通报,2011,0(5). |
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| 作者姓名： | 姜连连 林矫矫 韩红玉 董辉 赵其平 朱顺海 马卫娇 程军 曾艳波 黄兵 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海200241 |
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| 基金项目： | 上海市自然科学基金项目，中央级公益性科研院所基本科研业务费项目 |
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| 摘 要： | 为了研究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)的两个主要入侵发育阶段——子孢子和裂殖子的差异基因,根据已报道的子孢子与裂殖子差异的ESTs序列,应用RACE技术克隆获得了子孢子阶段差异表达的新基因全长cDNA序列,命名为ZL583.该基因全长为862 bp,开放阅读框(ORF)为486 bp,编码161个氨基酸,编码蛋白的分子量约为16.9 kD,利用生物信息学分析软件,分析新基因所编码蛋白的性质、定位、结构等特征.利用荧光定量PCR对柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段该基因的表达量进行分析显示,子孢子阶段的表达高于其他发育阶段.将ZL583克隆于pET-28a中构建重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)后经IPTG诱导表达,获得重组蛋白分子量约23 kD.免疫印迹分析显示该重组蛋白可与兔抗子孢子血清发生特异性反应,表明该蛋白具有较好的反应原性.该结果为进一步研究该基因的生物学功能奠定基础.
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| 关 键 词： | 柔嫩艾美耳球虫 子孢子 裂殖子 克隆 表达 |
Bioinformatics Analysis, Cloning and Expression of a Novel Gene from Eimeria tenella |
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| Jiang Lianlian,Lin Jiaojiao,Han Hongyu,Dong Hui,Zhao Qiping,Zhu Shunhai,Ma Weijiao,Cheng Jun,Zeng Yanbo,Huang Bing.Bioinformatics Analysis, Cloning and Expression of a Novel Gene from Eimeria tenella[J].Biotechnology Bulletin,2011,0(5). |
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| Authors: | Jiang Lianlian Lin Jiaojiao Han Hongyu Dong Hui Zhao Qiping Zhu Shunhai Ma Weijiao Cheng Jun Zeng Yanbo Huang Bing |
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