蓝藻橙色类胡萝卜素蛋白的基因克隆及在大肠杆菌中的异源表达和功能分析北大核心CSCD |
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引用本文: | 刘畅罗著张梦如杨玉梅刘娴龚明邹竹荣.蓝藻橙色类胡萝卜素蛋白的基因克隆及在大肠杆菌中的异源表达和功能分析北大核心CSCD[J].生物技术通报,2016(7):138-145. |
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作者姓名: | 刘畅罗著张梦如杨玉梅刘娴龚明邹竹荣 |
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作者单位: | 1.云南师范大学生命科学学院云南省生物质能源和环境生物技术重点实验室教育部生物质能源持续发展和应用工程研究中心650500; |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31160169;31460067) |
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摘 要: | 旨在体内证明蓝藻橙色类胡萝卜素蛋白(OCP)具备不依赖类胡萝卜素的单线态氧(~1O_2)清除功能。通过PCR扩增蓝藻OCP基因,对其进行原核诱导表达,并通过细菌点板和生长曲线测定法检验它在大肠杆菌中的抗~1O_2活性。结果表明,直接从蓝藻水体提取的宏基因组中成功扩增得到OCP基因SyOCP,其编码区大小为954 bp。生物信息学分析表明,SyOCP来源于主要蓝藻种类——集胞藻(Synechocystis sp.PCC 6803)。经IPTG诱导,SyOCP基因在大肠杆菌中获得了高水平的可溶性表达。另外,异源表达SyOCP的重组大肠杆菌对常见的~1O_2光敏诱发剂染料——亚甲基蓝的耐受性得到了显著增强。蓝藻OCP(不结合类胡萝卜素)内在的抗~1O_2功能在大肠杆菌中得到了体内验证。
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关 键 词: | 蓝藻 橙色胡萝卜素蛋白 宏基因组 单线态氧 亚甲基蓝 |
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